山東產(chǎn)丹參抑菌活性及其評價方法研究.pdf

1、目的：丹參為常用中藥,化學成分眾多,且具有廣泛多樣的藥理活性,其脂溶性成分如隱丹參酮等具有明顯的抗炎、抗菌等作用,但在臨床上應用很少,也極少作為脂溶性成分研究的檢測指標;此外,由于丹參質(zhì)量受生長環(huán)境、氣候變化、種植技術、品種等多種因素影響,其脂溶性成分的含量有較大差異,因而抑菌活性也各不相同。本課題以山東不同產(chǎn)地的丹參藥材為研究對象,建立丹參藥材中含量較高的丹參酮Ⅰ、丹參酮ⅡA和隱丹參酮3種主要脂溶性有效成分的含量測定方法,研究丹參抑菌

2、活性與產(chǎn)地的相關性,為合理開發(fā)利用丹參資源提供科學依據(jù);建立丹參微生物檢定法,用微生物檢定法評價丹參抑菌程度,以保證其質(zhì)量控制指標與臨床療效相一致。
　　 方法：本課題首先以最低抑菌濃度為評價指標,檢測了丹參乙醇提取液對大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞桿菌、短小芽孢桿菌、白色念珠菌的最低抑菌濃度,并分別考察了提取方式、滅菌方式以及不同pH值的丹參提取液對其抑菌活性的影響;采用高效液相色譜法,建立了同時測定隱丹

3、參酮、丹參酮ⅡA和丹參酮Ⅰ三種脂溶性成分含量的方法,并對山東八個不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材進行了三種脂溶性成分的含量檢測;采用管碟法,考察了隱丹參酮、丹參酮ⅡA和丹參酮Ⅰ三種丹參脂溶性成分對金黃色葡萄球菌的抑菌活性,通過與其脂溶性成分的含量對比,探討了丹參抑菌程度與其脂溶性成分的相關性;參照抗生素微生物檢定法,建立了丹參微生物檢定法,并測定了山東三個產(chǎn)區(qū)的丹參藥材的效價。
　　 結果：數(shù)據(jù)顯示,丹參乙醇提取液對大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌

4、、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞桿菌、短小芽孢桿菌均具有抑制作用,其最低抑菌濃度(MIC)分別為:20mg/mL、20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL、80mg/mL。加熱回流1小時提取物,抑菌效果較好,而不同pH值和不同滅菌方式,對丹參的抑菌活性均無影響。采用高效液相色譜法,對山東八個不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材三種脂溶性成分的含量檢測結果顯示,不同產(chǎn)區(qū)的丹參藥材其三種脂溶性成分的含量各不相同,并且對金黃色葡萄球菌的抑菌活性也各不相同,隱丹

5、參酮含量高的丹參藥材其抑菌活性較高。建立了丹參對照藥材、隱丹參酮微生物檢定一劑量法的標準曲線,并應用該方法對山東沂源悅莊、新泰、泗水楊柳等三地的紫花丹參進行效價測定,其效價分別為:1352.82u/mL、1383.41u/mL、422.09u/mL。
　　 結論：不同產(chǎn)區(qū)丹參脂溶性成分的含量不同,其抑菌活性不同,抑菌活性與其脂溶性成分的含量相關;丹參微生物檢定法可實現(xiàn)其質(zhì)量控制指標與藥用療效的相關性,為丹參抑菌作用在臨床上的應用