參龍煎劑與北沙參影響實(shí)驗(yàn)性肺纖維化的機(jī)制研究.pdf

1、肺間質(zhì)纖維化(PF)是一種原因不明、發(fā)病機(jī)制不清、治療尚無(wú)確實(shí)有效方法的一類以彌漫性肺泡炎和肺泡結(jié)構(gòu)紊亂并最終導(dǎo)致肺組織纖維化為特征的間質(zhì)性肺疾病?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)以糖皮質(zhì)激素和細(xì)胞毒類藥物治療，但尚無(wú)任何方案能逆轉(zhuǎn)炎癥過程或肺纖維化性病變。在中醫(yī)領(lǐng)域，治療研究的焦點(diǎn)開始從單味中藥向中藥復(fù)方抗纖維化轉(zhuǎn)變，并以凸現(xiàn)出其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。中醫(yī)理論把肺纖維化歸為“肺痿”、“肺痹”范疇，認(rèn)為肺纖維化的病位在肺而與多臟相關(guān)，尤以肺腎最為主要，病機(jī)以虛(肺腎氣陰

2、兩虛)為本，瘀(瘀血阻滯肺絡(luò))為標(biāo)，在治療上以補(bǔ)肺益腎、祛瘀通絡(luò)為治療法則，故擬定參龍煎劑。 研究目的： 本實(shí)驗(yàn)研究從病理形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)染色和分子生物學(xué)等多角度、多靶點(diǎn)探討中藥復(fù)方參龍煎劑和北沙參對(duì)博萊霉素致大鼠肺纖維化模型作用機(jī)制的研究，并比較其優(yōu)勢(shì)。 材料和方法： 1.采用氣管內(nèi)注入博萊霉素的方法復(fù)制大鼠肺纖維化模型； 2.本實(shí)驗(yàn)分為五組，正常組、模型組、參龍煎劑劑量組、北沙參組和醋酸強(qiáng)

3、的松組，針對(duì)肺纖維化病理演變過程，分為7天、14天、28天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。 3.參龍煎劑和北沙參對(duì)博萊霉素所致大鼠肺纖維化的肺組織形態(tài)的研究； 通過對(duì)模型大鼠一般狀況觀察分析、HE染色、MASSON染色并行圖像分析方法，觀察各組病理組織形態(tài)學(xué)的變化，對(duì)大鼠肺纖維化模型進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而研究參龍煎劑對(duì)肺纖維化模型大鼠的作用機(jī)制，并比較各治療組在整體狀態(tài)和局部組織的不同； 4.參龍煎劑和北沙參對(duì)博來(lái)霉素所致大鼠肺

4、纖維化肺組織TNF-α蛋白的表達(dá)研究通過免疫組織化學(xué)染色方法，結(jié)合圖像半定量分析技術(shù)，研究TNF-α蛋白表達(dá)在肺纖維化不同時(shí)期的變化，以及參龍煎劑和北沙參對(duì)其的影響比較，進(jìn)一步探討參龍煎劑從免疫組化方面對(duì)肺纖維化的作用機(jī)制。 5.參龍煎劑和北沙參對(duì)博萊霉素致大鼠纖維化中MMP-2mRNA/TIMP-1mRNA(金屬基質(zhì)蛋白酶-2/金屬基質(zhì)蛋白酶組織抑制劑-1mRNA)表達(dá)影響的機(jī)制研究。 通過RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈

5、反應(yīng))的方法，結(jié)合圖像半定量分析技術(shù)，研究MMP-2mRNA/TIMP-1mRNA表達(dá)在肺纖維化不同時(shí)期的變化，以及參龍煎劑和沙參對(duì)其的影響的比較，進(jìn)一步探討參龍煎劑從分子生物學(xué)方面對(duì)肺纖維化的作用機(jī)制。 結(jié)果： 1.成功復(fù)制大鼠肺纖維化模型； 2.參龍煎劑能明顯改善肺纖維化大鼠的整體狀態(tài)、減少肺泡炎及纖維化的面積，從組織結(jié)構(gòu)上減輕PF的程度，優(yōu)于北沙參； 3.參龍煎劑和北沙參均可以降低TNF-α蛋白表達(dá)