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文檔簡介
1、目的:初步建立蛋類特異性IgE和IgG4的檢測方法,并探討簡單的熱加工對五種蛋清中抗原的免疫原性的影響。 方法:抗原提取分為未加工組和熱加工組。熱加工組為100℃去離子水煮10分鐘,未加工組不做任何處理。用ELISA法定性檢測30例雞蛋過敏患兒特異性IgE和IgG4水平。另采用瑞典Pharmacia體外抗原(Unicap)測定系統(tǒng)檢測蛋清特異性IgE(f1)的陽性率,比較兩種方法的符合率。 結(jié)果: ⑴初步建立了蛋
2、類過敏原sIgE和IgG4的ELISA反應(yīng)條件:包被條件雞蛋和鴨蛋以1:12000,鵝蛋、鵪鶉蛋和鴿蛋以1:16000稀釋,血清稀釋濃度為1:10,生物素標(biāo)記的抗人IgE稀釋濃度1:2000,辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉素親和素稀釋濃度1:5000,辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG4稀釋濃度1:2500。 ⑵ Phamacia Unicap檢測結(jié)果37份標(biāo)本中,有9份為蛋清陽性,陽性率24.32%;本實驗采用的ELISA方法檢測結(jié)果在
3、37份標(biāo)本中,有8份為蛋清陽性,陽性率為21.62%。陽性率比較用SPSS11.0卡方檢驗(Fisher's Exact Test),結(jié)果λ2=0.076,P=1.000>0.050,沒有統(tǒng)計學(xué)差異,即兩種方法的檢驗符合率較高。 ⑶未加工組五種蛋清sIgE檢測結(jié)果:雞蛋、鴨蛋、鵝蛋、鵪鶉蛋和鴿蛋的陽性率,分別為73.33%、70.00%、53.33%、43.33%、40.00%。雞蛋和鴨蛋的陽性率值較鵝蛋,鵪鶉蛋和鴿蛋為高。Fi
4、sher's確切概率法檢驗結(jié)果,χ2=11.123;IgG4檢測結(jié)果,分別為96.67%、90.00%、93.33%、83.33%、53.33%。雞蛋和鵝蛋的陽性率值較鴨蛋,鵪鶉蛋和鴿蛋為高。Fisher's確切概率法檢驗結(jié)果,χ2=21.941。熱加工組sIgE檢測結(jié)果分別為70.00%、63.33%、46.67%、43.33%、33.33%。雞蛋的陽性率值仍然最高,鴿蛋最低,各組和未加工組比較陽性率均下降。Fisher's確切概率法
5、檢驗結(jié)果,χ2=10.760;IgG4檢測結(jié)果分別為93.33%、90.00%、83.33%、80.00%、46.67%。雞蛋和鵝蛋的陽性率值較鴨蛋,鵪鶉蛋和鴿蛋為高。Fisher's確切概率法檢驗結(jié)果,χ2=21.544。 結(jié)論: ⑴本實驗所采用的ELISA方法和Phamacia Unicap檢測方法比較,檢驗符合率較高; ⑵加工對抗原免疫原性有影響,其趨勢表現(xiàn)為免疫原性有所降低,但是仍具有激活sIgE和IgG
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