miR-150-通過修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源的exosome影響膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖凋亡的相關(guān)研究.pdf

1、背景：外泌體(exosomes)是一類直徑在30-120nm之間、密度在1.13-1.19g/mL的脂質(zhì)雙分子層的小囊泡，它們可被受體細(xì)胞吸收。Exosomes可由多種細(xì)胞分泌，如紅細(xì)胞、血小板、樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等。近年來，大量證據(jù)表明exosomes能以多種機(jī)制參與疾病發(fā)生發(fā)展的全過程，從而在細(xì)胞調(diào)控、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化等多種生物學(xué)進(jìn)程中發(fā)揮重要的作用。最初認(rèn)為exosomes是包裹細(xì)胞內(nèi)“廢棄”物質(zhì)的“垃圾袋

2、”，沒有生物學(xué)功能，然而最近骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源(Bone mesenchymal stem cells，BMSCs)的exosomes被證實(shí)可作為多種藥物的載體，在腫瘤治療中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。然而經(jīng)miR-150*修飾的BMSCs-exosomes能否對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系發(fā)揮抑癌作用，尚不清楚。
　　目的：研究miR-150*修飾對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來源的exosomes(BMSCs-exosomes)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的影響。
　　方

3、法：通過實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)miR-150*在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織與正常組織間的表達(dá)量差異。培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone mesenchymalstem cells，BMSCs)，分別轉(zhuǎn)染miR-150*模擬物和陰性對(duì)照序列，上調(diào)BMSCs中miR-150*表達(dá)水平，提取BMSCs培養(yǎng)基中的exosome。通過Western blotting驗(yàn)證exosomal的表面標(biāo)記蛋白CD63和flotillin-1，

4、在透射電鏡下觀察exosome的形態(tài)。通過CCK-8和細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-150*修飾BMSCs來源的exosome對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的影響。
　　結(jié)果：miR-150*在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織中表達(dá)明顯低于正常腦組織，轉(zhuǎn)染miR-150*模擬物能明顯提高BMSCs來源的exosome中miR-150*的表達(dá)。miR-150*修飾BMSCs來源的exosome能有效抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論：miR-150*在膠