高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型中腎臟病理改變及HGF表達的研究.pdf

1、新生兒尤其是早產(chǎn)兒各臟器發(fā)育不成熟，對缺血缺氧耐受性差，易出現(xiàn)器官功能受損，臨床使用氧療的機會相對較多，但持續(xù)吸入高濃度氧會導致不同程度的肺損傷，甚至發(fā)展成慢性肺疾?。–LD）。近年來國內(nèi)外學者對高濃度氧致肺損傷進行了廣泛研究，關(guān)于高濃度氧對視網(wǎng)膜、腦及肝腸組織等器官的損傷也有報道，但對腎臟影響的相關(guān)研究少見。國內(nèi)外尚未見持續(xù)高濃度氧暴露致慢性肺損傷時腎臟病理改變的研究。肝細胞生長因子（HGF）是一種多功能因子，能刺激多種上皮和內(nèi)皮細胞

2、進行有絲分裂、促進小管形態(tài)發(fā)生，并具有抗細胞凋亡的作用，它在腎臟的發(fā)育、急性損傷及再生中具有較強的作用。本研究以足月新生大鼠為研究對象，建立高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型，對新生大鼠的肺及腎臟進行病理觀察，觀察腎組織細胞凋亡狀態(tài)及HGF表達的動態(tài)變化，探討高濃度氧對腎臟的損傷及其機制，以期對臨床早產(chǎn)兒高濃度氧肺損傷過程中腎臟損傷的可能及預(yù)防措施提供指導。 第一章持續(xù)高濃度氧暴露對新生大鼠腎臟病理的影響 目的:觀察持續(xù)吸入高

3、濃度氧對新生大鼠肺組織及腎臟的病理改變，探討高濃度氧對新生大鼠肺組織及腎臟的影響。 方法:新生SD大鼠出生后12小時內(nèi)隨機分組，分別持續(xù)暴露于90％以上氧（高氧組，HO）和空氣（空氣組，Air）中，于生后3、7、14、21d留取肺組織（左側(cè)）及腎臟（左腎）標本。蘇木素-伊紅（HE）染色動態(tài)觀察肺組織及腎臟病理學改變，測量肺泡面積/肺間隔面積（A/S）及放射狀肺泡計數(shù)（RAC）：原位末端標記法（TUNEL染色法）檢測腎臟細胞凋亡指

4、數(shù)（AI）。 結(jié)果:①肺組織HE染色結(jié)果：與Air組比較，3d HO組肺泡腔內(nèi)可見少許紅細胞滲出（嗜伊紅樣物質(zhì)）及肺泡間隔炎癥細胞浸潤；7d HO組肺泡腔增大，肺泡壁薄，肺間質(zhì)細胞增加；14d HO組肺泡腔明顯增大，部分肺泡融合，肺泡數(shù)量減少，肺間質(zhì)細胞增生；21d HO組正常肺泡結(jié)構(gòu)消失，數(shù)量明顯減少，肺泡腔直徑明顯增大，且大面積肺泡融合，肺泡間隔菲薄，大量間質(zhì)細胞增生。②腎臟HE染色結(jié)果：與Air組比較，3d HO組腎小球毛

5、細血管充血，腎小囊腔變窄；7d HO組，腎小球細胞增生（<25％），系膜細胞為主，髓質(zhì)毛細血管增生、充血，見少許間質(zhì)細胞增生；14dHO組腎小球細胞增生（>25％，<50％），部分見局灶性玻璃樣變，系膜細胞增生，髓質(zhì)血管增生，間質(zhì)細胞增生明顯（>50％），小管上皮細胞增生；21d HO組皮質(zhì)腎小球細胞增生明顯，見局灶性玻璃樣變，系膜細胞增生明顯，可見個別淋巴細胞浸潤，皮髓質(zhì)交界區(qū)腎小囊腔擴張，髓質(zhì)區(qū)腎小管增生，間質(zhì)細胞增生為主（>75％

6、），有紅細胞外滲，腎小管細胞胞核增大，部分見空泡樣變性。③腎臟細胞凋亡結(jié)果：兩組各日齡組均可見腎臟細胞凋亡。3d Air組腎臟AI最低。HO組AI從3d起即高于Air組，具有顯著性差異，并隨著日齡的延長逐漸升高，但21d時AI有所降低。 結(jié)論:①肺泡發(fā)育障礙是高濃度氧致新生大鼠肺臟損傷的主要病理改變。②腎臟系膜細胞及腎小管上皮細胞增生是高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型中腎臟的主要病理改變。隨著高濃度氧暴露時間延長腎臟損傷逐漸加重。③

7、細胞凋亡增加可能參與高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型中腎臟的損傷發(fā)生、發(fā)展過程。 第二章持續(xù)高濃度氧暴露對新生大鼠腎臟HGF表達的影響 目的:動態(tài)觀察高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型中腎組織HGF蛋白表達的變化，探討HGF表達變化在高濃度氧致新生大鼠肺損傷模型中腎臟損傷修復中的意義。 方法:新生SD大鼠出生后12小時內(nèi)隨機分組，分別持續(xù)暴露于90％以上氧（高氧組，HO）和空氣（空氣組，Air）中，于生后3、7、14、21

8、d留取腎臟（左腎）標本，采用免疫組化法（SABC法）檢測腎臟組織HGF蛋白表達。 結(jié)果:①腎臟組織HGF蛋白表達結(jié)果：各日齡組均有HGF蛋白表達。Air組腎臟組織HGF蛋白表達從第3d起隨著日齡的延長呈逐漸升高趨勢，但21d時明顯回落。HO組腎臟組織HGF蛋白表達從第3d起隨著日齡的延長逐漸升高，14d達高峰，21d時明顯回落。兩組間同一時間點比較，HO組3d、7d、14d，腎臟組織HGF蛋白表達顯著增多，其平均值均較相應(yīng)Air