下咽鱗癌的治療及化療敏感基因的篩選和應(yīng)用.pdf

1、第一部分：臨床研究部分下咽鱗癌不同方案治療臨床分析 目的：分析下咽鱗癌不同方案臨床治療結(jié)果，探討不同方案對(duì)預(yù)后的影響。方法：回顧分析187例下咽鱗癌臨床資料，將病例分為綜合治療組，單純手術(shù)組，單純放療組。比較三組的生存率，復(fù)發(fā)率以及分析喉功能保留與否對(duì)生存率的影響。 結(jié)果：5年總體生存率44.9％。Ⅰ、Ⅱ期生存率(85.7％)高于Ⅲ、Ⅳ期(37.1％)(P＜0.01)。綜合治療組，單純手術(shù)組，單純放療組的5年總體生存率分

2、別為60.8％，38.7％，22.0％。綜合治療組明顯高于單純手術(shù)治療組和單純放射治療組(P＜0.05)。Ⅲ、Ⅳ期5年生存率分別為綜合治療75.7％和45.3％，單純手術(shù)治療為33.3％和17.6％，單純放射治療為16.7％和7.7％。綜合治療生存率明顯高于單純手術(shù)治療和單純放射治療(P＜0.05)?？傮w復(fù)發(fā)率44.9％。Ⅲ、Ⅳ期病例復(fù)發(fā)率為48.4％，明顯高于Ⅰ、Ⅱ期的25％(P＜0.05)。各治療組中，Ⅲ、Ⅳ期病例的5年復(fù)發(fā)率分別為

3、單純手術(shù)治療60.9％，單純放射治療80％，綜合治療26.7％。單純手術(shù)治療和單純放射治療的復(fù)發(fā)率明顯高于綜合治療(P＜0.01)。Ⅲ、Ⅳ期病例中，喉功能保留和不保留患者的5年生存率分別為72.4％，46.2％和60.0％，36.8％.兩者相比差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。 結(jié)論：下咽鱗癌綜合治療優(yōu)于單一治療。 第二部分：臨床實(shí)驗(yàn)研究部分 Ⅰ.不同化療敏感性的下咽鱗癌差異基因表達(dá)譜的篩選 目的：篩選化療敏

4、感性不同的下咽鱗癌的差異基因表達(dá)譜。分析基因功能和信號(hào)途徑的變化，為臨床評(píng)估化療敏感性提供潛在基因指標(biāo)。 方法：選取誘導(dǎo)化療敏感和不敏感的下咽鱗癌各4例，分別提取mRNA，依次體外反轉(zhuǎn)錄為cDNA和cRNA，不同生物素標(biāo)記和片斷化后制成cRNA探針，與人類基因組芯片雜交，對(duì)雜交信號(hào)掃描并進(jìn)行歸一化處理后，使用GCOS4.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。以SignalLogRatio≥1和changeP-value≤0.05作為篩選差異表達(dá)基因的

5、標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)生物學(xué)過(guò)程和功能途徑對(duì)差異基因進(jìn)行分類。 結(jié)果：篩選差異表達(dá)基因119條，其中上調(diào)基因65條，下調(diào)基因54條。差異表達(dá)基因包括信號(hào)傳導(dǎo)，細(xì)胞周期，細(xì)胞凋亡，代謝酶類，細(xì)胞因子等，化療敏感組中EGFR，TGF-β和TNFR等細(xì)胞信號(hào)通路異常。 結(jié)論：化療敏感性不同的下咽鱗癌其基因表達(dá)譜不同。 Ⅱ.差異基因與下咽鱗癌化療敏感性的相關(guān)性 目的：篩選差異性顯著和同一功能信號(hào)途徑的基因，分析其表達(dá)水平與化

6、療敏感性的關(guān)系。確定預(yù)測(cè)化療敏感性的標(biāo)志基因。 方法：選擇SignalLogRatio≥1.0和同一功能信號(hào)途徑的基因(CD1，F(xiàn)AS，STAT3)作為標(biāo)志基因。免疫組化方法檢測(cè)CD1，F(xiàn)AS和STAT3基因在不同化療敏感性下咽鱗癌中的表達(dá)，以陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)超過(guò)25％為標(biāo)志基因表達(dá)陽(yáng)性。比較其陽(yáng)性率與化療敏感性的相關(guān)性。結(jié)果以列聯(lián)表卡方進(jìn)行檢驗(yàn)分析。 結(jié)果：CD1,FAS和STAT3的陽(yáng)性表達(dá)率分別為58.3％(7/12)，

7、50％(6/12)和50％(6/12)?；熋舾泻筒幻舾械南卵树[癌中，CD1的陽(yáng)性表達(dá)率分別為100％(6/6)，16.7％(1/6)，F(xiàn)AS和STAT3在化療敏感組中陽(yáng)性表達(dá)率均為100％(6/6)，在化療不敏感組中均為陰性。兩組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論：信號(hào)傳導(dǎo)(STAT3等)，細(xì)胞周期(CD1等)，代謝酶類(GSP1等)，細(xì)胞基質(zhì)(MMP2等)等基因的高表達(dá)與化療敏感性有關(guān)。 Ⅲ.差異基因表

8、達(dá)譜對(duì)下咽鱗癌化療敏感性的預(yù)測(cè)作用 目的：回顧分析標(biāo)志基因在化療敏感性不同的下咽鱗癌中的表達(dá)，比較單一基因和聯(lián)合標(biāo)志基因(3條以上基因)預(yù)測(cè)下咽鱗癌化療敏感性的準(zhǔn)確性。探討基因譜對(duì)化療敏感性的預(yù)測(cè)作用。 方法：收集1996年1月～2003年12月間在我院治療的T3T4期，誘導(dǎo)化療2程以上的下咽鱗癌病例的治療前標(biāo)本，免疫組化方法檢測(cè)CD1，F(xiàn)AS，STAT3基因標(biāo)志物和聯(lián)合(2條以上)標(biāo)志基因在不同化療敏感性的下咽鱗癌中的

9、表達(dá)。Logistic回歸模型分析單一基因和聯(lián)合基因標(biāo)志物對(duì)下咽鱗癌化療敏感性的預(yù)測(cè)率。 結(jié)果：41例標(biāo)本中，CD1，F(xiàn)AS，STAT3和聯(lián)合標(biāo)志基因的陽(yáng)性表達(dá)率分別為41.5％(17/41)，36.6％(16/41)，31.7％(13/41)和41.5％(17/41)。在化療敏感和不敏感下咽鱗癌中，陽(yáng)性表達(dá)率分別為57.9％(11/19)，27.3％(6/22)；57.9％(11/19)，22.7％(5/22)；47.4％(9