組織蛋白酶S、K和胱抑素C在壓力負荷性心肌肥厚大鼠左心室重構中表達變化的研究.pdf

1、目的:
　　 高血壓心臟病是導致心力衰竭的主要病因之一,心室重構是高血壓發(fā)展中的一個必然的病理生理過程,主要包括心肌細胞的重構和細胞外基質(zhì)(ECM)重構。組織蛋白酶(Cat)是一類在酸性環(huán)境中活化的溶酶體蛋白酶,包括Cat B、L、S、K等。CatS、K具有強力的膠原和彈力蛋白分解活性,可分泌到細胞外參與ECM重構,活性受其抑制物胱抑素C(Cyst C)的嚴格調(diào)控。但至今很少有關Cat S、K和CystC在心室重構中的報道。本研

2、究通過腹主動脈縮窄建立高血壓大鼠模型來探討壓力負荷性心肌肥厚左室重構中Cat S、K和CystC的表達及其相互關系。
　　 方法:
　　 雄性Wistar大鼠60只被隨機分成四組,4周假手術組(F4)、8周假手術組(F8)、4周手術組(T4)以及8周手術組(T8)。采用腹主動脈縮窄法構建大鼠心肌肥厚和心力衰竭模型。在血流動力學檢測前行超聲心動圖檢查,測量室間隔厚度(IVST),左心室后壁厚度(LVPWT),舒張期左室內(nèi)徑

3、(LVEDd)。血流動力學檢查左室收縮壓(LVSP),左室舒張末壓(LVEDP),心率(HR),外周收縮壓(SBP),外周舒張壓(DBP)及平均動脈壓(MBP)。然后處死各觀測終點大鼠,取出心臟,灌洗后分離提前左心室并稱重。用苦味酸-天狼猩紅染色法分析左心室肌間質(zhì)和血管周圍纖維化程度,用實時熒光定量PCR和免疫組化法分別檢測Cat S、Cat K和Cyst C mRNA及蛋白表達。
　　 結果:
　　 1、各組大鼠血流動

4、力學指標及超聲心動圖檢查結果
　　 與F4組大鼠相比,T4組大鼠的左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)、SBP、IVST、LVPWT增大(P＜0.05),呈現(xiàn)典型的心肌肥厚病理變化。與F8組大鼠相比,T8組大鼠的LVMI、SBP、IVST、LVPWT、LVEDd、LVEDP明顯增大(P＜0.05),并有毛發(fā)失去光澤、食欲不振、精神萎靡、行動遲緩等心力衰竭表現(xiàn)。
　　 2、各組大鼠左室膠原纖維的表達情況
　　 苦味酸天狼星紅染

5、色鏡下Ⅰ型膠原纖維呈紅色或黃色,Ⅲ型膠原纖維呈綠色。與F4組大鼠相比,T4組大鼠的CVF、PVCA明顯增高(P＜0.01)。與F8組大鼠相比,T8組大鼠的CVF、PVCA明顯增高(P＜0.01)。
　　 3、各組大鼠Cat S、Cat K和Cyst C免疫組化結果
　　 Cat S、Cat K和Cyst C表達遍及心肌細胞和冠狀動脈血管平滑肌細胞。與F4組大鼠相比,T4組大鼠的Cat S、Cat K和Cyst C表達明顯

6、增高,與F8組大鼠相比,T8組大鼠的Cat S、Cat K表達顯著增高,但Cyst C的表達無統(tǒng)計學差異。
　　 4、各組大鼠Cat S、Cat K和Cyst C C mRNA的表達水平
　　 與F4組大鼠相比,T4組大鼠的Cat S、Cat K表達明顯增高(P＜0.05),T8大鼠心肌Cat S、Cat K mRNA表達進一步升高,顯著高于F8組大鼠(P＜0.01)。T4組大鼠心肌Cyst C Mrna表達明顯高于F4