組織蛋白酶S、K和胱抑素C在壓力負(fù)荷性心肌肥厚大鼠左心室重構(gòu)中表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的:
　　 高血壓心臟病是導(dǎo)致心力衰竭的主要病因之一,心室重構(gòu)是高血壓發(fā)展中的一個(gè)必然的病理生理過(guò)程,主要包括心肌細(xì)胞的重構(gòu)和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)重構(gòu)。組織蛋白酶(Cat)是一類在酸性環(huán)境中活化的溶酶體蛋白酶,包括Cat B、L、S、K等。CatS、K具有強(qiáng)力的膠原和彈力蛋白分解活性,可分泌到細(xì)胞外參與ECM重構(gòu),活性受其抑制物胱抑素C(Cyst C)的嚴(yán)格調(diào)控。但至今很少有關(guān)Cat S、K和CystC在心室重構(gòu)中的報(bào)道。本研

2、究通過(guò)腹主動(dòng)脈縮窄建立高血壓大鼠模型來(lái)探討壓力負(fù)荷性心肌肥厚左室重構(gòu)中Cat S、K和CystC的表達(dá)及其相互關(guān)系。
　　 方法:
　　 雄性Wistar大鼠60只被隨機(jī)分成四組,4周假手術(shù)組(F4)、8周假手術(shù)組(F8)、4周手術(shù)組(T4)以及8周手術(shù)組(T8)。采用腹主動(dòng)脈縮窄法構(gòu)建大鼠心肌肥厚和心力衰竭模型。在血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)前行超聲心動(dòng)圖檢查,測(cè)量室間隔厚度(IVST),左心室后壁厚度(LVPWT),舒張期左室內(nèi)徑

3、(LVEDd)。血流動(dòng)力學(xué)檢查左室收縮壓(LVSP),左室舒張末壓(LVEDP),心率(HR),外周收縮壓(SBP),外周舒張壓(DBP)及平均動(dòng)脈壓(MBP)。然后處死各觀測(cè)終點(diǎn)大鼠,取出心臟,灌洗后分離提前左心室并稱重。用苦味酸-天狼猩紅染色法分析左心室肌間質(zhì)和血管周圍纖維化程度,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫組化法分別檢測(cè)Cat S、Cat K和Cyst C mRNA及蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組大鼠血流動(dòng)

4、力學(xué)指標(biāo)及超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果
　　 與F4組大鼠相比,T4組大鼠的左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)、SBP、IVST、LVPWT增大(P＜0.05),呈現(xiàn)典型的心肌肥厚病理變化。與F8組大鼠相比,T8組大鼠的LVMI、SBP、IVST、LVPWT、LVEDd、LVEDP明顯增大(P＜0.05),并有毛發(fā)失去光澤、食欲不振、精神萎靡、行動(dòng)遲緩等心力衰竭表現(xiàn)。
　　 2、各組大鼠左室膠原纖維的表達(dá)情況
　　 苦味酸天狼星紅染

5、色鏡下Ⅰ型膠原纖維呈紅色或黃色,Ⅲ型膠原纖維呈綠色。與F4組大鼠相比,T4組大鼠的CVF、PVCA明顯增高(P＜0.01)。與F8組大鼠相比,T8組大鼠的CVF、PVCA明顯增高(P＜0.01)。
　　 3、各組大鼠Cat S、Cat K和Cyst C免疫組化結(jié)果
　　 Cat S、Cat K和Cyst C表達(dá)遍及心肌細(xì)胞和冠狀動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞。與F4組大鼠相比,T4組大鼠的Cat S、Cat K和Cyst C表達(dá)明顯

6、增高,與F8組大鼠相比,T8組大鼠的Cat S、Cat K表達(dá)顯著增高,但Cyst C的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4、各組大鼠Cat S、Cat K和Cyst C C mRNA的表達(dá)水平
　　 與F4組大鼠相比,T4組大鼠的Cat S、Cat K表達(dá)明顯增高(P＜0.05),T8大鼠心肌Cat S、Cat K mRNA表達(dá)進(jìn)一步升高,顯著高于F8組大鼠(P＜0.01)。T4組大鼠心肌Cyst C Mrna表達(dá)明顯高于F4