鹿茸多肽促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的：通過研究相關(guān)信號傳導(dǎo)通路中的關(guān)鍵分子，如受體TPK，立早基因c-fos基因，細(xì)胞周期相關(guān)激酶等在細(xì)胞和分子水平探討鹿茸多肽促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖的機(jī)制，為鹿茸多肽在軟骨損傷組織工程修復(fù)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。有利于更好的開發(fā)利用該藥。研究結(jié)果可對軟骨細(xì)胞增殖相關(guān)細(xì)胞信號途徑進(jìn)行驗(yàn)證。 方法：1以胰酶膠原酶消化法獲取兔軟骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。2采用相差顯微鏡觀察其生長情況，MTT法描繪生長曲線。3以不同濃度的鹿茸多肽(PAP)刺激軟骨細(xì)胞增殖

2、，48小時(shí)后用MTT法觀察細(xì)胞增殖情況。4再將實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分成空白對照組，鹿茸多肽組，酪氨酸受體激酶阻斷劑Genistein與PAP共同刺激的軟骨細(xì)胞組和單純Genistein組。用MTT法和流式細(xì)胞儀觀察Genistein對PAP增殖情況及生長周期的影響。用免疫組化SABC法檢測細(xì)胞周期蛋白cyclinA在PAP作用下的表達(dá)變化。RT-PCR法檢測原癌基因c-fosmRNA表達(dá)。 結(jié)果：PAP作用下c-fosmRNA與cyclin