大腸桿菌腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞侵襲蛋白yijP的表達(dá)純化和功能分析.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文大腸桿菌腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞侵襲蛋白yijP的表達(dá)純化和功能分析姓名：王淳申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳譽華20030401②纓臆計數(shù)法分析yijP蛋叁辯HBMEC的生長摔裁搏耀；③光學(xué)顯微鏡下觀察libMEC的形態(tài)變化；④辯j罱熒光顯徽轆觀察細(xì)胞核的改變；⑥流式綱胞儀棱測販二倍體峰；⑥璩疆糖凝菝毫泳觀察DNAladder；@Westernblotting方法檢濺easpase3的活往冀段；⑧采耀t～

2、檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分柝。講究絡(luò)票16Histag—yijP簧鑫賡靜表這與撬純：大激擴增M15(pREP4、pQE一鼬P)黻體細(xì)胞。將IPTG誘導(dǎo)后05h靜瓣胞裘解秘進(jìn)行SDS—PAGE分?jǐn)兀?1KD懿爵覓一條遨漸增嵩的蛋巍條帶，這與推輯的Histag—y4jP融和蓬自分子爨壤簿。蛋鑫經(jīng)過Ni一1VrAAgarose黎糖屢輯釋：簿折疊，SD$一PAGE分析表襞寨翔屢析箍純專復(fù)性蒜籀豢盤條帶位鬟冬細(xì)胞裂鰓褥巾的靛置一致。2yijP爨自質(zhì)功熊分

3、橫：◇MTr實驗檢測結(jié)暴發(fā)瑰yijP蛋自搿葶l起萌顯瓣細(xì)臆增楚蘩制佟蔫，yijP實驗縫篙對照維存在統(tǒng)詩學(xué)意義(PO。05)，并存在濃囊依羧譙。②傳統(tǒng)方法傲緶胞德長曲線，連續(xù)觀察發(fā)現(xiàn)：從給藥麝的第16h秤始，嫡P緩和對照組出現(xiàn)差異(P《O01)，44h后yijP組細(xì)胞幾乎全部死亡。說驥嫡P蛋巍對HBMEC的毒牲作用存在對閥依耬毀。@壯∥藤y妒蟹宣島HBMEC孵育16h后，耀差顯徽髓穰熒光顯微鏡下細(xì)胞表現(xiàn)如掰亡特征。④澈式繃胞儀可在正常二倍