超聲微泡促進(jìn)骨髓間質(zhì)細(xì)胞跨血腦屏障遷移的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、缺血性中風(fēng)是致死、致殘的主要病因之一。腦損傷很容易遺留永久性神經(jīng)功能缺失,其原因體現(xiàn)在腦組織對自身的損傷修復(fù)能力不強(qiáng),同時(shí)采用藥物治療效果不佳。研究學(xué)者通過動物實(shí)驗(yàn)以及臨床實(shí)驗(yàn)證明:移植胚胎神經(jīng)細(xì)胞和多能干細(xì)胞可促進(jìn)損傷腦組織的修復(fù),改善神經(jīng)功能缺失癥狀,提示細(xì)胞移植方法是治療缺血腦損傷的很有希望的途徑。大量實(shí)驗(yàn)研究表明,骨髓間質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells, BMSC)是最有潛力的一種修復(fù)細(xì)胞,其在腦內(nèi)移植

2、后,能夠存活下來,并不斷遷移和分化,而后在一定程度上修復(fù)腦梗死后神經(jīng)功能的障礙。移植細(xì)胞促進(jìn)腦損傷修復(fù)的機(jī)制包括替代壞死細(xì)胞功能、抑制局部瘢痕形成和促進(jìn)損傷局部神經(jīng)再生等,而移植細(xì)胞向腦損傷局部的遷移是促進(jìn)腦損傷修復(fù)的前提。因此,探討促進(jìn)移植細(xì)胞向腦損傷局部遷移的措施有非常重要的實(shí)際意義。
　　血腦屏障影響經(jīng)靜脈移植細(xì)胞向腦損傷局部的遷移,降低移植治療效果。近年研究發(fā)現(xiàn),超聲聯(lián)合微泡技術(shù)可安全、有效地暫時(shí)性開放血腦屏障,促進(jìn)治療藥

3、物通過血腦屏障,提高腦實(shí)質(zhì)內(nèi)藥物濃度,達(dá)到提高治療效果的目的。但目前尚未見到超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對移植細(xì)胞向腦內(nèi)遷移影響的研究報(bào)道。因此,深入探討超聲聯(lián)合微泡技術(shù)促進(jìn)經(jīng)靜脈移植骨髓間質(zhì)細(xì)胞向腦內(nèi)遷移的可能性及其機(jī)制,有望為缺血性中風(fēng)帶來新的治療途徑。
　　研究內(nèi)容:(1)評價(jià)大鼠前腦缺血/再灌注模型血腦屏障完整性:光鏡和電鏡下觀察模型動物血腦屏障完整性:包括腦血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接、基底膜和星形膠質(zhì)細(xì)胞偽足完整性;觀察血腦屏障結(jié)構(gòu)蛋白表

4、達(dá):包括腦血管內(nèi)皮細(xì)胞;閉合蛋白 claudin-5基底膜;IV膠原、層連蛋白星型膠質(zhì)細(xì)胞突起;S100B蛋白等;評價(jià)血腦屏障功能:光鏡觀察伊文思藍(lán)滲出量,電鏡下觀察硝酸鑭染色。(2)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對前腦缺血/再灌注大鼠血腦屏障通透性的影響:(3)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)能否影響經(jīng)靜脈移植的骨髓間質(zhì)細(xì)胞向缺血性腦損傷區(qū)遷移的活動:觀察體外擴(kuò)增和鑒定骨髓間質(zhì)細(xì)胞;觀察經(jīng)靜脈注射移植骨髓間質(zhì)細(xì)胞;不比較骨髓間質(zhì)細(xì)胞向腦缺血損傷區(qū)遷移的數(shù)量

5、和距離;觀察AchE陽性纖維密度。(4)觀察超聲聯(lián)合微泡技術(shù)對經(jīng)靜脈移植的骨髓間質(zhì)細(xì)胞對大鼠神經(jīng)功能的影響:水迷宮試驗(yàn)觀察空間學(xué)習(xí)、記憶能力。
　　研究結(jié)果:(1)缺血再灌注模型可以在一定程度上增加血腦屏障通透性。(2)超聲微泡可以開放腦缺血/再灌注血腦屏障。(3)超聲微泡可以有效開放 BBB,并促進(jìn) MSCS向腦內(nèi)遷移和AchE陽性纖維增多。(4)超聲微泡聯(lián)合MSCs移植可以促進(jìn)前腦缺血大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力。
　　研究結(jié)