超聲微泡增效骨髓干細胞移植效率的實驗研究.pdf

1、目的：骨髓干細胞(MSOs)心肌移植可以部分改善心肌梗死患者的心功能,但移植效率低下問題一直是制約臨床干細胞移植應用的瓶頸。我們通過在動物水平研究超聲聯(lián)合微泡增效骨髓干細胞心肌移植的作用,為臨床上心肌梗死后MSCs移植提供一種新的思路。 方法：選取12只2月齡中國家豬隨機分為對照組(A組,n=4)、實驗組(B組,n=8)：根據(jù)干細胞移植后對實驗動物行磁共振(MRI)檢查的時間,實驗組又被分為B1組(移植后0小時檢查,n=4)及B

2、2組(移植后24小時檢查,n=4)。分別抽取骨髓,體外分離、純化、培養(yǎng)骨髓干細胞；介入法建立急性心肌梗死模型。造模成功后第13天進行超順磁性氧化鐵顆粒標記培養(yǎng)干細胞,第14天再次經(jīng)冠狀動脈注入自體骨髓干細胞(5×106)及超聲造影劑Sono Vue(聲諾維),僅實驗組在體表予超聲(1MHz、2W/cm2,連續(xù)輻射90秒)輻射心肌梗死區(qū)。分別于術(shù)后0小時、24小時活體行磁共振檢查示蹤心臟移植的MSCs;磁共振檢查后立即處死實驗動物,取心肌

3、梗死區(qū)、梗死周邊區(qū)、正常區(qū)心肌做病理切片,行HE染色及普魯士監(jiān)染色；透射電鏡觀察心肌超微結(jié)構(gòu)變化及血管內(nèi)皮間隙變化。通過以上檢查分析對比各組MSCs移植效率,找出較好的移植方法。 結(jié)果： 1)：磁共振：各組在心肌梗死區(qū)和梗死周邊區(qū)均能監(jiān)測到超順磁性氧化鐵顆粒標記的骨髓干細胞形成的低密度區(qū),且低密度區(qū)B組較A組多,B2組略多余B1組; 2)普魯士藍染色：病理切片及心肌圖片檢查,普魯士藍染色陽性細胞實驗組較對照組明顯