超聲聯(lián)合微泡增效干細(xì)胞移植治療心肌梗死作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]國(guó)內(nèi)外動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證實(shí)超聲聯(lián)合微泡能夠顯著增強(qiáng)干細(xì)胞移植治療缺血性心血管疾病，但對(duì)其安全性和作用機(jī)制仍不明確，本實(shí)驗(yàn)在體外對(duì)此進(jìn)行初步探討。 [方法]體外培養(yǎng)豬內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）和血管內(nèi)皮細(xì)胞（VECs），隨機(jī)分為對(duì)照組、超聲組、超聲微泡組，干預(yù)后采用CCK-8檢測(cè)EPCs增殖活性，PI染色流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡壞死及細(xì)胞周期。ELISA法檢測(cè)VECs上清VEGF、SDF-1濃度；硝酸還原法檢測(cè)EPCs上清NO含量，分

2、光光度計(jì)檢測(cè)其各型一氧化氮合酶（NOS）相對(duì)活力。 [結(jié)果] （1）低聲強(qiáng)超聲（0.25-1 W/c㎡）聯(lián)合微泡作用下對(duì)EPCs增殖活性無(wú)明顯影響；較高聲強(qiáng)（>1 w/c㎡）作用下，隨聲強(qiáng)逐漸增大，細(xì)胞增殖活性逐漸降低。與對(duì)照組比較，超聲微泡組（1MHz，1W/c㎡，90s）對(duì)EPCs凋亡壞死及細(xì)胞周期無(wú)明顯影響，而同樣條件下超聲組細(xì)胞凋亡壞死明顯增加，同時(shí)顯著抑制細(xì)胞DNA合成。 （2）超聲微泡組VECs上清液

3、的VEGF和SDF-1濃度分別為（375.57±31.15）pg/ml、（4792.95±90.12）pg/ml，均比對(duì)照組顯著增高。超聲組VEGF濃度為（350.47±13.26）pg/ml，與對(duì)照組無(wú)差異；而SDF-1為（2898.14±67.85）pg/ml，較對(duì)照組明顯降低。 （3）超聲微泡組EPCs上清液NO含量為（88.70±8.78）umol/l，i-NOS和c-NOS活力分別（10.81±0.95）U/ml、（4

4、.78±0.36）U/ml，較對(duì)照組顯著增加；超聲組NO含量無(wú)明顯改變，各型NOS活力較對(duì)照組有下降趨勢(shì)，無(wú)顯著差異。 （4）超聲聯(lián)合微泡作用下，L-精氨酸和雙氧水反應(yīng)生成NO為（8.70±1.56）umol/l，較對(duì)照組明顯增加，而單純超聲無(wú)此促進(jìn)作用。 [結(jié)論]超聲（1MHz，1W/c㎡，90s）聯(lián)合微泡對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖活性、凋亡壞死及細(xì)胞周期無(wú)不良影響；同時(shí)能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌細(xì)胞因子（VEGF、SDF-1），