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文檔簡介
1、目的:探討高鹽對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)分泌ET-1和PGI2的影響及阿托伐他汀干預的作用。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞株,選3-9代用于實驗,實驗分為三部分。第一部分,不同濃度NaCl對HUVECs活性的影響:選用濃度分別為136、141、146和151mmol/LNaCl培養(yǎng)液培養(yǎng)HUVECs24h,采用CCK8測細胞活性。第二部分,不同濃度NaCl對HUVECs ET-1和PGI2分泌的影響:選用不同鹽濃度,
2、干預HUVECs后,用ELISA檢測ET-1和PGI2;選用濃度為0.1、1和10μmol/L阿托伐他汀和濃度為25μmol/L的P38MAPK蛋白阻斷劑SB203580干預HUVECs1小時后,再與151mmol/L NaCL的培養(yǎng)液孵育,共孵育24h,運用ELISA檢測ET-1和PGI2。第三部分,高鹽及阿托伐他汀干預對HUVECs P38MAPK蛋白表達的影響:實驗分為對照組、151mmol/L NaCl組和151mmol/L N
3、aCL+10μmol/l阿托伐他汀組。采用Western blot檢測P38MAPK蛋白的表達。
結(jié)果:(1)136、141、146和151mmol/L鹽濃度對HUVECs活性無顯著影響,與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);(2)不同鹽濃度組呈濃度依賴性,促進HUVECs分泌ET-1,每組的增加率分別是7.9%、17.1%、28.8%、41.7%,與對照組比較以及各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);不同鹽濃
4、度組抑制HUVECs分泌PGI2,每組的抑制率分別是6.0%、15.2%、25.7%、37.8%,與對照組比較以及各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05):(3)在151mmol/L高鹽狀態(tài)下P38MAPK蛋白阻斷劑SB203580抑制ET-1分泌,促進PGI2分泌;與151mmol/L高鹽組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(4)在151mmol/L高鹽狀態(tài)下,不同阿托伐他汀濃度組增加PGI2分泌,每組的增加率分別是2.5%、
5、5.1%、10.3%;抑制ET-1分泌,每組的抑制率分別是2.0%、4.2%、9.6%;分別與對照組比較以及各組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05);(5)151mmol/L高鹽組促進P38MAPK蛋白表達,與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);阿托伐他汀抑制P38MAPK蛋白表達,與151 mmol/L NaCl組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結(jié)論:1 NaCl溶液通過P38MARK途徑呈濃度依賴性促進
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