IL-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對腎癌細胞的體內(nèi)外殺傷效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：觀察白細胞介素-2（IL-2）聯(lián)合不同劑量的索拉菲尼對腎癌786-O細胞的體內(nèi)殺傷效應(yīng)及對荷瘤小鼠生長情況的影響，為腎癌的臨床治療策略提供新的參考。
　　方法：取腎癌786-O細胞體外培養(yǎng)至培養(yǎng)對數(shù)生長期，24h后以IL-2（20umol/l）分別聯(lián)合索拉菲尼（6.9，13.8，20.8umol/l）作用于腎癌786-O細胞株，MTT(噻唑藍)比色法檢測 IL-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對腎癌786-0細胞株增值的影響，流式細胞

2、儀檢測各組對腎癌細胞凋亡率的影響。再取對數(shù)生長期的腎癌細胞株，胰蛋白酶消化離心后調(diào)整細胞濃度至5×104cell/ml，取細胞懸液分別接種于裸鼠后項中間皮下，0.3ml/只。成瘤后，分為空白對照組、索拉菲尼低劑量組、索拉菲尼中劑量組，索拉菲尼高劑量組，分別觀察它們對裸鼠移植瘤生長的抑制作用和荷瘤小鼠的耐受性。取荷瘤小鼠外周血，雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定各組小鼠血清IL-10的分泌量。然后用活檢針取腫瘤組織，免疫組化法檢測V

3、EGF因子和CD31的表達情況。
　　結(jié)果：MTT法發(fā)現(xiàn)各組均表現(xiàn)出對腎癌細胞的抑制作用，與單用IL-2相比，兩藥聯(lián)合應(yīng)用時抑制作用更明顯，且隨著處理時間的延長和濃度的增加，各組對腎癌細胞增殖的抑制也是逐漸增加，呈現(xiàn)出時間-劑量依賴性。各組間差異存在統(tǒng)計學意義（P<0.05），其中以高劑量組48h的抑制率最高，達到(74.67±1.87)％。在誘導細胞凋亡方面，流式細胞儀檢測發(fā)現(xiàn)各組之間沒有顯著性差異（P>0.01）。荷瘤小鼠模型

4、成功建立，體外實驗中觀察到高劑量組小鼠腫瘤生長緩慢，明顯低于其他各組，但隨著劑量的增加小鼠的藥物耐受性也下降明顯。高劑量組與中劑量組、低劑量組及單用IL-2組荷瘤小鼠的體質(zhì)量差異有統(tǒng)計學意（P<0.01）。ELISA結(jié)果顯示，與對照組相比，IL-10存在明顯差異（P<0.01），且在三組之間內(nèi)部之間也有顯著性差異（P<0.01）。進一步的免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各組小鼠腫瘤組織內(nèi)部的VEGF因子、CD31分子的差異也存在統(tǒng)計學意義（P<0.0