IL-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對(duì)腎癌細(xì)胞的體內(nèi)外殺傷效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：觀察白細(xì)胞介素-2（IL-2）聯(lián)合不同劑量的索拉菲尼對(duì)腎癌786-O細(xì)胞的體內(nèi)殺傷效應(yīng)及對(duì)荷瘤小鼠生長(zhǎng)情況的影響，為腎癌的臨床治療策略提供新的參考。
　　方法：取腎癌786-O細(xì)胞體外培養(yǎng)至培養(yǎng)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，24h后以IL-2（20umol/l）分別聯(lián)合索拉菲尼（6.9，13.8，20.8umol/l）作用于腎癌786-O細(xì)胞株，MTT(噻唑藍(lán))比色法檢測(cè) IL-2聯(lián)合不同劑量索拉菲尼對(duì)腎癌786-0細(xì)胞株增值的影響，流式細(xì)胞

2、儀檢測(cè)各組對(duì)腎癌細(xì)胞凋亡率的影響。再取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的腎癌細(xì)胞株，胰蛋白酶消化離心后調(diào)整細(xì)胞濃度至5×104cell/ml，取細(xì)胞懸液分別接種于裸鼠后項(xiàng)中間皮下，0.3ml/只。成瘤后，分為空白對(duì)照組、索拉菲尼低劑量組、索拉菲尼中劑量組，索拉菲尼高劑量組，分別觀察它們對(duì)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用和荷瘤小鼠的耐受性。取荷瘤小鼠外周血，雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定各組小鼠血清IL-10的分泌量。然后用活檢針取腫瘤組織，免疫組化法檢測(cè)V

3、EGF因子和CD31的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：MTT法發(fā)現(xiàn)各組均表現(xiàn)出對(duì)腎癌細(xì)胞的抑制作用，與單用IL-2相比，兩藥聯(lián)合應(yīng)用時(shí)抑制作用更明顯，且隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)和濃度的增加，各組對(duì)腎癌細(xì)胞增殖的抑制也是逐漸增加，呈現(xiàn)出時(shí)間-劑量依賴性。各組間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中以高劑量組48h的抑制率最高，達(dá)到(74.67±1.87)％。在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡方面，流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)各組之間沒(méi)有顯著性差異（P>0.01）。荷瘤小鼠模型

4、成功建立，體外實(shí)驗(yàn)中觀察到高劑量組小鼠腫瘤生長(zhǎng)緩慢，明顯低于其他各組，但隨著劑量的增加小鼠的藥物耐受性也下降明顯。高劑量組與中劑量組、低劑量組及單用IL-2組荷瘤小鼠的體質(zhì)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（P<0.01）。ELISA結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，IL-10存在明顯差異（P<0.01），且在三組之間內(nèi)部之間也有顯著性差異（P<0.01）。進(jìn)一步的免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各組小鼠腫瘤組織內(nèi)部的VEGF因子、CD31分子的差異也存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0