CD226基因多態(tài)性與系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)性研究.pdf

1、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種慢性自身免疫病，以T、B淋巴細(xì)胞異?；罨a(chǎn)生大量自身抗體及損害全身多個(gè)器官組織為特征，目前該病具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚，流行病學(xué)及全基因組關(guān)聯(lián)性分析表明遺傳因素在SLE的發(fā)病中起重要作用。主要組織相容性復(fù)合體(The major histocompatibility complex,MHC)即人類白細(xì)胞抗原(human leukocyte antigen

2、,HLA)，已經(jīng)被證明是SLE重要的易感基因，然而，HLA系統(tǒng)只占了遺傳因素40％的比例，許多非HLA基因被發(fā)現(xiàn)與SLE的發(fā)病顯著相關(guān)。最近的研究表明CD226基因的一個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(single nucleotide polymorphism,SNP)rs763361(Gly307Ser)在歐洲人群中與多種自身免疫病如1型糖尿病，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，自身免疫性甲狀腺炎及多發(fā)性硬化的易感性有關(guān)。
　　 CD226是一種分子量為6

3、7-Kda的I型跨膜糖蛋白，參與T細(xì)胞的黏附及共刺激作用，廣泛表達(dá)于自然殺傷細(xì)胞，CD4+及CD8+T細(xì)胞，單核細(xì)胞，血小板及B細(xì)胞亞群。有研究報(bào)道SLE患者NK細(xì)胞上CD226分子表達(dá)缺陷可以導(dǎo)致NK細(xì)胞易于凋亡，提示CD226在自身免疫性疾病的發(fā)病中有一定的作用。
　　 本研究擬首次在中國(guó)漢族人群中探討SLE與該多態(tài)性位點(diǎn)的相關(guān)性，同時(shí)探討CD226基因多態(tài)性是否與CD226分子表達(dá)相關(guān)進(jìn)而引起一系列臨床表現(xiàn)。具體分為兩個(gè)部

4、分：第一部分 CD226基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)Gly307Ser在中國(guó)漢族系統(tǒng)性紅斑狼瘡人群的研究
　　 目的：在中國(guó)漢族人群中對(duì)CD226基因單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)Gly307Ser(rs763361)進(jìn)行檢測(cè)，研究CD226-Gly307Ser與SLE遺傳易感性的關(guān)系，并探討該多態(tài)性位點(diǎn)與臨床指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性。
　　 方法：按照美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)于1982年修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)選取門診及住院的SLE患者261例，健康對(duì)照者279

5、例，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段多態(tài)性分析(PCR-RFLP)技術(shù)，針對(duì)rs763361位點(diǎn)進(jìn)行基因分型；運(yùn)用PLINK1.06進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)并分析基因與疾病關(guān)聯(lián)性，計(jì)算P值，相應(yīng)的95％可信區(qū)間及OR值，同時(shí)分析T危險(xiǎn)等位基因及危險(xiǎn)基因型TT與臨床指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：SLE和健康對(duì)照組分別進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)，兩組均符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，Phw分別為

6、0.71和0.18；.與對(duì)照組相比，CD226基因rs763361位點(diǎn)T等位基因頻率明顯升高(P=0.018，OR=1.34，95％CI:1.05-1.74)，TT基因型頻率在SLE組高于對(duì)照組(P=0.025，OR=1.79，95％CI=1.07-3.01)；在SLE患者中抗dsDNA陽性組較抗dsDNA陰性組T等位基因及TT基因型頻率均明顯增高(P值分別為0.003和0.015)。
　　 結(jié)論：在中國(guó)漢族人群中，CD226基

7、因rs763361位點(diǎn)與SLE易感性有關(guān)且與抗dsDNA的產(chǎn)生相關(guān)，那么將來基于該多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行功能性研究會(huì)為進(jìn)一步了解自身免疫性疾病的發(fā)病提供線索。
　　 第二部分系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血單個(gè)核細(xì)胞CD226基因表達(dá)的研究
　　 目的：研究CD226基因在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者與健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)的表達(dá)及其與CD226-Gly307Ser多態(tài)性、疾病活動(dòng)度的相關(guān)性。
　　 方法：應(yīng)用實(shí)時(shí)

8、熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)SLE患者組90例及健康對(duì)照組30例PBMCs CD226 mRNA表達(dá)水平，同時(shí)分析CD226基因表達(dá)量在三種基因型之間是否存在差異，并且探討其與SLE臨床指標(biāo)的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：SLE組與健康對(duì)照組相比，CD226基因表達(dá)水平明顯降低(P<0.01)；SLE組三種基因型之間的CD226mRNA表達(dá)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；紅細(xì)胞沉降率、24小時(shí)尿蛋白定量、抗核抗體滴度、SLEDAI評(píng)分及