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文檔簡介
1、對于丙型肝炎病毒(hepatitisCvirusHCV)感染尚缺乏確實(shí)有效的治療方法,HCV疫苗的研制是當(dāng)前國際上研究的熱點(diǎn),位于包膜蛋白2(envelopglycoprotein2,E2)N端的高變區(qū)1(HypervariableRegion1,HVR1)被認(rèn)為是中和性免疫原性表位所在.該研究分三個部分進(jìn)行E2區(qū)蛋白的表達(dá)及免疫原性研究.第一部分研究的結(jié)果表明,E2抗體的存在與血清HCVRNA水平有關(guān),與感染的自限性無關(guān),利用重組E2
2、蛋白進(jìn)行E2抗體的檢測可用于輔助HCV感染的篩查.通過第二、第三部分的研究,我們成功地構(gòu)建了上海、北京、山東三個地區(qū)兩種基因型,共四個HCV株的HVR1區(qū)原核表達(dá)載體,并在大腸桿菌中表達(dá)了四種HVR1*DHFR融合蛋白,經(jīng)Ni-NTA層析純化后,獲得純度較高的融合蛋白,純化蛋白的得率約為320~800μg/100ml培養(yǎng)液.該研究分析了E2抗體與HCV病毒血癥的關(guān)系,分別構(gòu)建了四個HVR1區(qū)的原核表達(dá)載體和兩個真核表達(dá)載體.在原核表達(dá)系
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