ANS和UFGT基因沉默及對采后草莓花色苷代謝的影響.pdf

1、果實的采后色澤是反映果實品質和貯藏性的重要指標，在采后貯藏過程中草莓果實出現(xiàn)顏色加深甚至變暗的現(xiàn)象，嚴重影響其商品性，但是，目前關于采后草莓色澤變化的影響因素及這些因素是如何影響采后色澤的研究還不夠深入。本試驗利用VIGS技術，沉默草莓花色苷合成途徑中的ANS和UFGT關鍵酶基因，構建這兩個基因的TRV干擾載體并轉染“甜查理”品種大綠果時期草莓果實，于對照果實全紅期時采摘，然后在常溫25℃貯藏，測定貯藏過程中果實的相關生理指標、花色苷相

2、關代謝物質含量及相關基因表達量的變化，探討ANS和UFGT基因沉默對采后果實花色苷代謝及相關基因的影響。主要研究結果如下：
　　1.通過TRV pYY13為干擾載體，采用LIC的方法進行ANS和UFGT基因克隆，以轉色期草莓果實的cDNA為模板分別克隆出長為547bp的FaANS和468bp的FaUFGT的特異基因片段，成功構建VIGS干擾載體并轉染草莓果實。
　　2.基因沉默的果實從表型變化、sqRT-PCR和 qRT-P

3、CR分子水平均驗證果實ANS和UFGT基因沉默成功。其中，ANSi果實中ANS基因表達水平下調，僅為對照果實的17.5％，UFGTi果實中UFGT基因表達水平也下調，為對照果實的28.3%；基因沉默后果實中花色苷代謝相關物質含量顯著下降，說明ANS和UFGT基因與花色苷相關代謝有重要影響，同時基因沉默后 FaF3’H基因分別上調，推測 ANS和UFGT基因沉默在降低花色苷積累的同時能促進槲皮素等黃酮醇類物質的合成。
　　3.測定貯

4、藏期間相關生理指標結果表明，ANS和UFGT基因沉默對果實中TA含量、pH值、TSS、總糖和還原糖含量上升有抑制作用，并且維生素C含量高于對照果，說明ANS和UFGT基因沉默對采后草莓果實的衰老有一定抑制作用。
　　4. HPLC檢測果實貯藏期間花色苷代謝相關物質含量結果表明，ANSi和UFGTi果實中花色苷含量、黃烷-3-醇類含量明顯低于對照果，而黃酮醇類含量和對照果持平甚至更高，說明果實中ANS和UFGT基因沉默阻斷了采后花色