大鼠異基因肝移植中NK-IFN-γ的活化對(duì)肝臟損傷以及肝細(xì)胞增生的作用.pdf

1、序言：
　　 肝臟移植是現(xiàn)今治療損傷所導(dǎo)致的終末期肝病唯一行之有效的辦法。由于肝臟的免疫特殊性，肝內(nèi)免疫系統(tǒng)更多的由天然免疫系統(tǒng)組成，肝內(nèi)有著豐富的天然免疫細(xì)胞諸如Kupffer細(xì)胞，NK細(xì)胞，NKT細(xì)胞等。最近的研究顯示，肝臟疾病和肝再生與先天性免疫系統(tǒng)的組成成分密切相關(guān)。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，在急性排斥反應(yīng)模型中，NK細(xì)胞在術(shù)后被大量激活，隨之分泌IFN-γ以形成快速優(yōu)勢微環(huán)境來促發(fā)獲得性免疫反應(yīng)。然而，包括IFN-γ和IL-6在內(nèi)

2、的一些先天性免疫系統(tǒng)因子可能參與部分肝切除后肝再生的啟動(dòng)作用。IFN-γ是一種對(duì)天然免疫和獲得性免疫具有重要意義的細(xì)胞因子，主要由NK和NKT細(xì)胞分泌。這兩種細(xì)胞是人類和鼠肝臟中淋巴細(xì)胞群的主要組成部分，在先天性免疫反應(yīng)中NK細(xì)胞作為第一道防線對(duì)抗病毒和微生物，對(duì)腫瘤免疫治療也有意義。在肝臟再生中IFN-γ和NK細(xì)胞發(fā)揮的作用對(duì)移植術(shù)后肝細(xì)胞的損傷和肝臟再生的作用仍然不清楚。一些研究認(rèn)為NK細(xì)胞的活化可能對(duì)肝再生起負(fù)向調(diào)節(jié)作用。而另一些

3、研究認(rèn)為在移植肝臟中NK細(xì)胞增加，可能參與保護(hù)性免疫監(jiān)督機(jī)制。因此，研究NK/IFN-γ是否參與調(diào)整肝損傷和再生具有重要意義。
　　 材料與方法：
　　 健康雄性Lewis和DA大鼠，體重220-260g按照不同分組（同基因組L-L，異基因組L-DA，DA-L）行原位肝移植術(shù)。術(shù)后1，2，3，4，5，7天分別處死大鼠取材。觀察肝臟的損傷程度（血清學(xué)指標(biāo)、凋亡指數(shù)的評(píng)價(jià)）、肝臟再生情況評(píng)估（細(xì)胞增值核抗原PCNA，Ki-6

4、7）、同時(shí)對(duì)IFN-γ/STAT1和IL-6/STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其下游基因表達(dá)情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。選用方法有ELISA技術(shù)、免疫組織化學(xué)檢測、RT-PCR、流式細(xì)胞儀、Western blot等技術(shù)手段。
　　 結(jié)果：
　　 異基因組大鼠移植肝損傷和肝細(xì)胞凋亡明顯高于同基因組，與此同時(shí)肝細(xì)胞分裂增殖則明顯低于同基因組。異基因組IFN-γ mRNA的表達(dá)及其下游細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1（STAT1）的表達(dá)也明顯高于同基

5、因組。相反的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）的表達(dá)在異基因組中的表達(dá)卻明顯低于同基因組。我們進(jìn)一步去除了異基因組中的NK細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)IFN-γ/STAT1的表達(dá)明顯下降，而肝細(xì)胞的增殖明顯上升。
　　 結(jié)論：
　　 與同基因組相比較，異基因肝移植組術(shù)后天然免疫系統(tǒng)（NK/IEN-γ）被激活，異基因移植組大鼠肝臟再生相比同基因組明顯抑制?；罨腘K細(xì)胞分泌IFN-γ，導(dǎo)致下游STAT1蛋白表達(dá)上調(diào)，STAT3表達(dá)下