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文檔簡介
1、病毒感染所引起的呼吸道疾病已經(jīng)成為世界性的常見疾病之一。人博卡病毒（HBoV）作為引起呼吸道感染的常見病毒之一，雖然發(fā)現(xiàn)相對較晚，但受到科研工作者的廣泛關(guān)注。而有效的診斷和治療需要具有高效價的抗體，才能建立系統(tǒng)的方法，單克隆抗體是病原檢測和診斷的主要工具。目前，有關(guān) HBoV單克隆抗體制備的研究很少，因此，HBoV單克隆抗體的制備對于HBoV的診斷和所引起的疾病的治療有重要意義。
本研究利用強大的原核表達(dá)載體 pET-30a構(gòu)
2、建重組質(zhì)粒，通過大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)重組 VP2蛋白，通過柱上變復(fù)性純化目的蛋白。利用血清檢查抗原。以純化蛋白作為抗原，免疫小鼠，利用雜交瘤技術(shù)及間接 ELISA方法篩選陽性雜交瘤細(xì)胞，小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生單克隆抗體，并對單克隆抗體進(jìn)行鑒定。
結(jié)果表明，構(gòu)建出 HBoVVP2基因的重組質(zhì)粒，表達(dá)并純化得到了重組 HBoVVP2蛋白，利用呼吸道感染患者血清檢測抗原，陽性率為77.7％，與國內(nèi)外檢出率基本一致，說明抗原較好。利用雜交瘤
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