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文檔簡介
1、腺病毒5型是一種十分有效的基因治療載體，廣泛應用于體內(nèi)體外的基因治療實驗。腺病毒5型能夠感染很多細胞，包括分裂細胞和靜止細胞。它的侵入機制主要包括兩個階段。首先，腺病毒以其knob蛋白和柯薩奇腺病毒受體（coxsackie adenovirus receptor，CAR）結(jié)合，錨定在細胞表面；然后，其五鄰體基底部（Penton base）再與整合素結(jié)合，整合素作為輔助分子介導了病毒內(nèi)吞進入內(nèi)涵體小泡。整個過程中，knob起了粘附病毒的作
2、用，五鄰體起了內(nèi)化病毒的作用，它們隔司其職，相互配合，兩者對腺病毒的感染至關重要。 腺病毒用于基因治療的一個主要問題是缺乏靶向性。為了解決這個問題，一個經(jīng)常采用的策略是在knob上進行靶向改造，使它不與CAR結(jié)合，而與目標受體結(jié)合。為了研究knob的結(jié)構(gòu)與功能，本研究表達了knob，CAR并制備了knob的單克隆抗體。 本研究利用大腸桿菌BL21(DE3)表達了knob蛋白。通過Ni2+-NTA系統(tǒng)的純化，純度可達95％
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