版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、背景;Alpha-促黑素(a-MSH)是一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素,隨著近年人們對(duì)a-MSH在皮膚色素調(diào)節(jié)、黑色素瘤的發(fā)生及炎癥免疫等方面調(diào)節(jié)作用的深入了解,開(kāi)始有人注意到a-MSH與瘢痕等纖維化疾病的關(guān)系,但國(guó)內(nèi)外尚無(wú)a-MSH與瘢痕成纖維細(xì)胞作用的文獻(xiàn)報(bào)道。在后基因組的研究中,蛋白質(zhì)組無(wú)疑是最重要的組成部分,它使得從整體上觀察a-MSH對(duì)人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的影響成為可能。蛋白質(zhì)組技術(shù)鑒定u-MSH作用的相關(guān)蛋白質(zhì),有助于
2、進(jìn)一步了解u-MSH對(duì)人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞作用的模式,有可能使a-MSH成為治療瘢痕的一種新方法。 目的:比較a-MSH處理前后人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜的變化,從整體的蛋白質(zhì)水平對(duì)a-MSH抑制成纖維細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)的分子機(jī)理進(jìn)行初步探索,同時(shí)為增生性瘢痕的發(fā)病機(jī)制研究提供線索。 方法:a-MSH處理體外培養(yǎng)的人皮膚和增生性瘢痕成纖維紐胞,利用固相pH梯度(IPG)雙向凝膠電泳(2-DE)分
3、離a-MSI-t處理前后人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的總蛋自質(zhì),考馬斯亮藍(lán)顯色,建立雙向凝膠電泳圖譜,經(jīng)FDQuest軟件圖像分析,選取部分差異表達(dá)的蛋白質(zhì),應(yīng)用基質(zhì)輔助激光解吸電禽飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)分析獲取肽質(zhì)量指紋圖譜,Mascot<'TM>軟件搜索MSDB數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定蛋白質(zhì)。 結(jié)果:(1)得到了分辨率和重復(fù)性較好的α-MSH處理前后人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞雙向凝膠電池圖譜,人皮膚成纖維細(xì)胞對(duì)照組和
4、處理組各3塊凝膠的平均蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)分別為634±15和591±20,平均匹配率分尉為81%和87%。對(duì)照組和處理組3塊不同的膠闖蛋白質(zhì)點(diǎn)在等電聚焦(mF)方向的偏差為0.73±0.29mm和0.83±0.53,在SDS-PAGE方向上的偏差為1.2±0.37mm和1.50.46mm。增生性瘢痕成纖維細(xì)胞對(duì)照組和處理組各3塊凝膠的平均蛋白質(zhì)點(diǎn)數(shù)分別為602±32和75918,平均匹配率分別為85%和89%。對(duì)照組和處理組3塊不同的膠間蛋白質(zhì)
5、點(diǎn)在IEF方向的偏差為0.86±0.23mm和0.69±0.17mm,在SDS-PAGE方向上的偏差為1.3±0.31mm和1.5±0.22mm。分別制得未處理組和α-MSH處理組平均膠,以平均膠進(jìn)行匹配,皮膚成纖維細(xì)胞組匹配率為81.2%,增生性瘢痕成纖維細(xì)胞組匹配率為81.9[%],皮膚與增生性瘢痕對(duì)照組匹配率為20.3%,處理組為15.1%。(2)篩選出差異表達(dá)蛋白質(zhì)點(diǎn)23個(gè)進(jìn)行質(zhì)譜分析,從中獲得20張較好的肽質(zhì)量指紋,經(jīng)查詢(xún)蛋白
6、質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定了annexin 1、熱休克蛋白27、波形蛋白、laminA和組織蛋白酶B等的11個(gè)差異表達(dá)蛋白質(zhì)。 結(jié)論:本研究建立了分辨高且重復(fù)性較好的α-MSH處理前后人皮膚和增生性瘢痕成纖維細(xì)胞雙向凝膠電冰圖譜,并識(shí)別訓(xùn)鑒定出了11種差異表達(dá)的蛋白質(zhì),實(shí)驗(yàn)證明α-MSH的抗纖維化機(jī)制可能涉及細(xì)胞凋亡、細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及細(xì)胞骨架構(gòu)建等方面,為α-MSH在臨床的運(yùn)用,治療增生性瘢痕等纖維化疾病奠立了初步基礎(chǔ),提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 增生性瘢痕和正常皮膚組織成纖維細(xì)胞培養(yǎng)上清的蛋白質(zhì)組成學(xué)研究.pdf
- 大黃素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 姜黃素對(duì)增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的生物學(xué)作用.pdf
- 水蛭素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 幾丁糖對(duì)增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的生物學(xué)作用.pdf
- 肝素對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞及兔耳增生性瘢痕影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- RNAi抑制PTN對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- RNAi抑制IKKβ對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 成纖維細(xì)胞凋亡在增生性瘢痕形成和轉(zhuǎn)歸中作用的研究.pdf
- 人增生性瘢痕和正常皮膚組織蛋白質(zhì)組學(xué)差異的初步研究.pdf
- SPARC對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原蛋白mRNA表達(dá)的影響.pdf
- 核酶對(duì)人增生性瘢痕中成纖維細(xì)胞膠原作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 不同藥物對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖和膠原合成的影響.pdf
- Il-1β對(duì)人皮膚瘢痕成纖維細(xì)胞增殖及膠原蛋白代謝的影響.pdf
- 饑餓誘導(dǎo)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞自噬發(fā)生.pdf
- ADMA對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞衰老的作用及機(jī)制研究.pdf
- 血管緊張素Ⅱ?qū)υ錾择:鄢衫w維細(xì)胞的活化作用及機(jī)制研究.pdf
- 三七總甙對(duì)人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 建立人增生性瘢痕成纖維細(xì)胞力學(xué)模型的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 漢防已甲素對(duì)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論