負(fù)性情緒積累加速D-gal衰老大鼠認(rèn)知衰退的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過改進(jìn)不可預(yù)知性心理應(yīng)激誘導(dǎo)大鼠的慢性負(fù)性情緒應(yīng)激，從行為學(xué)、生物化學(xué)、形態(tài)學(xué)等多角度觀察慢性負(fù)性情緒應(yīng)激對(duì) D-半乳糖（D-gal）衰老大鼠認(rèn)知功能的影響，初步探討慢性負(fù)性情緒應(yīng)激對(duì) D-gal大鼠認(rèn)知功能的影響及神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制，為老年認(rèn)知功能障礙的防治提供病因?qū)W證據(jù)，并為肝主疏泄和七情內(nèi)傷學(xué)說增添新認(rèn)識(shí)。
　　方法：選用 Wistar大鼠70只，雌雄各35只，雄鼠體重為360±10g，雌鼠體重為300±10g，SPF級(jí)

2、3月齡，按照曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分為空白對(duì)照組、D-gal衰老及腦老化組（簡(jiǎn)稱 D-gal組）、慢性負(fù)性情緒應(yīng)激組（簡(jiǎn)稱應(yīng)激組）、D-gal+慢性負(fù)性情緒應(yīng)激組（簡(jiǎn)稱應(yīng)激 D-gal組），每組14只，雌雄各半，其余為攻擊鼠。采用頸背部皮下多點(diǎn)注射 D-gal法（1ml/100g），對(duì) D-gal組和應(yīng)激 D-gal組復(fù)制衰老大鼠模型，1次/天，連續(xù)42天；自第15天起，采用改進(jìn)的不可預(yù)知性心理應(yīng)激方法誘導(dǎo)應(yīng)激組和應(yīng)激 D-gal組的負(fù)性情緒（單

3、一或復(fù)合出現(xiàn)的負(fù)性情緒），每天1種，隨機(jī)出現(xiàn)，連續(xù)4周。第37天至42天采用 Morris水迷宮法觀察各組大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化，應(yīng)激前及結(jié)束后（實(shí)驗(yàn)第43天）采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)法對(duì)各組大鼠進(jìn)行行為學(xué)觀察，并測(cè)定各組大鼠的糖水消耗量、24小時(shí)攝食量，實(shí)驗(yàn)第44至46天檢測(cè)各組大鼠視覺、聽覺、嗅覺功能。第47天取材并檢測(cè)以下指標(biāo)：①血漿激素水平：促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）、皮質(zhì)酮（CORT）；②血漿單胺類神經(jīng)遞質(zhì)：5-羥色胺（5-HT）、

4、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）；③觀察大鼠大腦皮質(zhì)、海馬的組織形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：
　　1.復(fù)制 D-gal衰老及腦老化大鼠模型。
　　1.1 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)：D-gal組尋臺(tái)時(shí)間較空白對(duì)照組延長。
　　1.2大腦皮質(zhì)、海馬的組織形態(tài)學(xué)變化：D-gal組大腦皮質(zhì)、海馬組織形態(tài)的擬老化改變與老齡動(dòng)物一致。
　　2.慢性負(fù)性情緒應(yīng)激加速 D-gal大鼠感官功能的衰退：嗅覺功能減退，視聽覺無顯著

5、性差異。
　　2.1聽覺震驚實(shí)驗(yàn)：應(yīng)激 D-gal組聽覺震驚反射采樣期加速度與 D-gal組比較，無顯著性差異。
　　2.2埋藏食物小球?qū)嶒?yàn)：應(yīng)激 D-gal組找到食物小球時(shí)間較 D-gal組延長。
　　2.3視覺懸崖實(shí)驗(yàn)：應(yīng)激 D-gal組視覺懸崖回避時(shí)間與 D-gal組比較，無顯著性差異。
　　3.慢性負(fù)性情緒應(yīng)激加速 D-gal大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的衰退：應(yīng)激 D-gal組Morris水迷宮尋臺(tái)時(shí)間較 D-ga

6、l組延長。
　　4.慢性負(fù)性情緒應(yīng)激升高D-gal大鼠下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸功能相關(guān)激素：應(yīng)激 D-gal組血漿 ACTH、CORT水平較 D-gal組升高。
　　5.慢性負(fù)性情緒應(yīng)激引起 D-gal大鼠血漿單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化：應(yīng)激D-gal組較 D-gal組血漿 NE水平、DA水平升高、5-HT水平下降。
　　6.應(yīng)激D-gal組大腦皮質(zhì)、海馬的組織學(xué)改變較D-gal組的擬老化改變加重。
　　結(jié)論：