宮頸癌細胞GM-CSF免疫學作用相關性研究.pdf

1、目的：
　　人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(hGM-CSF)是一種刺激造血干細胞增殖和分化的細胞因子，可誘導粒細胞及巨噬細胞前體細胞集落生長，主要由巨噬細胞和T淋巴細胞分泌，某些腫瘤細胞也可分泌產生，但不同類型腫瘤中腫瘤源性GM-CSF的免疫學作用及其調控機制仍不清楚。本實驗通過研究宮頸癌細胞GM-CSF的表達對環(huán)氧合酶-2(COX-2)和誘導性一氧化氮合酶(iNOS)表達的影響，探討GM-CSF在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　

2、　方法：
　　收集臨床宮頸癌標本52例及正常宮頸15例和宮頸上皮內瘤變(CIN)組織標本21例作為對照進行免疫組織化學染色，分析宮頸癌組織GM-CSF的表達與COX-2和iNOS表達的相關性;為了從細胞水平進一步論證其相關性，本實驗使用宮頸癌細胞系Caski細胞系，Caski細胞經GM-CSF轉染后過表達GM-CSF，并通過RT-qPCR和Western blot檢測COX-2和iNOSmRNA及蛋白的表達情況，以空質粒轉染的Ca

3、ski細胞為對照，在細胞模型中探討GM-CSF強制表達對COX-2和iNOS表達的影響。同時，通過GM-CSFsiRNA干擾Caski細胞GM-CSF表達后，用RT-qPCR及Western blot方法檢測iNOS/COX-2mRNA及蛋白表達情況。
　　結果：
　　免疫組化結果顯示，宮頸癌組織GM-CSF表達明顯低于正常組和CIN組（P均＜0.05），而COX-2及iNOS的表達顯著高于正常組(P＜0.01)，但與CIN

4、組無明顯差異;統(tǒng)計學分析發(fā)現GM-CSF與COX-2/iNOS的表達呈負相關（r=-0.542/-0.499）。細胞水平結果顯示，與空質粒轉染的細胞相比，轉染GM-CSF的Caski細胞COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表達水平都有顯著下降（P均＜0.05）;GM-CSF在被干擾后，干擾組與對照組相比COX-2/iNOS在mRNA及蛋白表達水平有明顯差異（P均＜0.05）。
　　結論：
　　在組織和細胞表達水平GM-CSF