基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)赭曲霉毒素A的高效電化學(xué)適體傳感器研究.pdf_第1頁(yè)
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1、赭曲霉毒素(Ochratoxins,OTs)是一種由赭曲霉、碳黑曲霉和純綠青霉產(chǎn)生的食源性毒素,主要污染糧谷類農(nóng)產(chǎn)品,與人類和動(dòng)物健康關(guān)系密切。其中以赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的毒性最大、散布最廣、污染程度最高。本研究利用電化學(xué)適體傳感器基于雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)研發(fā)設(shè)計(jì)了一種擁有超低檢測(cè)限的OTA檢測(cè)方法。首先,將一段捕獲探針固定在金電極上,然后加入與之互補(bǔ)的OTA適配體序列,使其與捕獲探針形成DNA雜交鏈。在環(huán)境中存在O

2、TA的情況下,雜交鏈上的OTA適配體會(huì)與游離的OTA結(jié)合,脫離電極。然后,加入檢測(cè)探針和兩段生物素標(biāo)記的互補(bǔ)DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu),與電極上剩余的捕獲探針結(jié)合,并引發(fā)雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。最后,在電極上滴加堿性磷酸酶(ST-AP),它與DNA鏈上的生物素結(jié)合,通過(guò)催化反應(yīng)底物中的α-萘酚磷酸鹽(α-NP)產(chǎn)生電化學(xué)信號(hào),DPV曲線隨OTA濃度的增高而增高。在優(yōu)化條件下,該檢測(cè)平臺(tái)對(duì)OTA的檢測(cè)線性范圍是0.005-100 ng/mL,檢測(cè)限可達(dá)2 pg

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