中藥復(fù)方和依那普利對糖尿病大鼠腎小管PKCα和ERK1-2表達影響的研究.pdf

1、目的:復(fù)制糖尿病大鼠模型，觀察中藥復(fù)方和依那普利對糖尿病大鼠腎小管PKCa和ERK1/2表達的影響，探討自擬的中藥復(fù)方和依那普利對糖尿病大鼠腎臟保護作用的作用機制。
　　方法:雄性SD大鼠隨機分為5組:正常對照組（N組），糖尿病組（D組），糖尿病中藥復(fù)方1號治療組（Y1組），糖尿病中藥復(fù)方2號治療組（Y2組），糖尿病依那普利治療組（E組）。采用鏈尿佐菌素尾靜脈注射(55mg/kg)的方法復(fù)制糖尿病動物模型。生化方法測血糖、24h尿

2、蛋白、血肌酐、甘油三酯、膽固醇，并計算腎臟指數(shù)。HE染色光鏡檢查腎組織形態(tài)學(xué)變化。免疫組織化學(xué)法檢測大鼠腎臟PKC、TGF-β1、FN、ERK1/2蛋白表達情況，RT-PCR法檢測大鼠腎皮質(zhì)ERK2mRNA水平。
　　結(jié)果:①D組大鼠腎臟指數(shù)、血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、膽固醇較N組明顯升高（P＜0.01）;Y1組、Y2組與D組大鼠相比，24h尿蛋白量、膽固醇、甘油三酯顯著降低（P＜0.01或P＜0.05）;Y1組、E組

3、大鼠血肌酐較D組明顯降低(P＜0.05);而Y2組大鼠血肌酐較D組有所降低，但不具有統(tǒng)計學(xué)意義。②D組大鼠出現(xiàn)明顯的腎臟形態(tài)學(xué)改變，系膜區(qū)基質(zhì)沉積增多，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，空泡變性及基底膜增厚，Y1組、Y2組和E組明顯改善。③免疫組化結(jié)果顯示:N組大鼠腎小管上皮細(xì)胞PKCa蛋白少量表達，D組較N組明顯增加(P＜0.01)，Y1組、Y2組顯著低于D組(P＜0.01)，E組也明顯低于D組（P＜0.01），各治療組之間差異無顯著性（P＞0.0

4、5）。N組大鼠腎小管上皮細(xì)胞ERK1/2蛋白具有基礎(chǔ)水平的表達，D組較N組明顯增加（P＜0.01），Y1組顯著低于D組（P＜0.01），E組、Y2組也明顯低于D組（P＜0.05），各治療組之間差異無顯著性（P＞0.05）。N組大鼠腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1蛋白幾乎無表達，D組表達明顯高于N組（P＜0.01），Y1組、Y2組較D組明顯降低（P＜0.05），E組也明顯低于D組(P＜0.05)，各治療組之間差異無顯著性（P＞0.05）。N組大

5、鼠腎小管基底膜FN蛋白表達較少，D組表達明顯高于N組（P＜0.01），Y1組、Y2組較D組明顯降低(P＜0.01)，E組也明顯低于D組(P＜0.01)，各治療組之間差異無顯著性（P＞0.05）。④RT-PCR結(jié)果顯示，ERK2 mRNA在N組有基礎(chǔ)水平的表達，在D組顯著增加（P＜0.01），Y1組、Y2組顯著低于D組（P＜0.01），E組也顯著低于D組（P＜0.01），各治療組之間差異無顯著性（P＞0.05）。
　　結(jié)論:1、依那

6、普利可能通過抑制PKCa、ERK1/2表達而減少TGF-β1的生成，使腎組織FN等ECM沉積減少，從而延緩或阻斷糖尿病腎臟肥大和纖維化，改善腎功能。2、中藥復(fù)方1號、2號對DN的防治機制可能是通過抑制PKCa-ERK1/2信號通路而下調(diào)TGF-β1的過度表達，減輕腎臟肥大、減少ECM積聚，從而減輕腎臟的病理變化。3、中藥復(fù)方1號、2號可顯著降低糖尿病大鼠24h尿蛋白、甘油三酯、膽固醇的水平，明顯改善糖尿病大鼠的腎功能，發(fā)揮其保護腎臟的作