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1、毛細(xì)管電泳是一種強(qiáng)大的分析技術(shù),從分析小分子到生物大分子都具有很高的效率。它具有高分離效率,高分辨率,快速,易自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn),毛細(xì)管電泳在化學(xué),生物技術(shù),環(huán)境等方面得到了極大的應(yīng)用。
毛細(xì)管電泳不僅是一種有效的分離工具而且在酶的研究和藥物開發(fā)方面也是一個(gè)有效的平臺(tái)。在眾多的毛細(xì)管電泳技術(shù)中,電泳媒介微分析技術(shù)(EMMA)在酶抑制劑篩選,酶動(dòng)力學(xué)研究等方面是一個(gè)十分有效的工具。這種篩選通過使用二極管陣列檢測(cè)器接合多通道毛細(xì)管電
2、泳能實(shí)現(xiàn)高通量。毛細(xì)管中固定酶制作微反應(yīng)器和微流控芯片在酶研究、蛋白組學(xué)、診斷學(xué)等方面也是一個(gè)的十分有希望的微型化的方法。
高血壓是最常見的心血管疾病之一,嚴(yán)重威脅著人類的健康。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)能將血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換為有高活性的血管緊張素Ⅱ,引起血壓升高。在抗高血壓藥物中,血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)是一類常見的有效的藥物,如卡托普利,賴諾普利。但合成ACEI類降壓藥物的使用常伴隨著多種不良反應(yīng)。近年來,大量
3、研究發(fā)現(xiàn)ACEI廣泛存在于天然產(chǎn)物中,天然產(chǎn)物中的ACEI與合成ACEI相比有安全性高、降壓持久、無副作用等優(yōu)點(diǎn)。從中草藥和食品中間篩選沒有副作用的新抗高血壓藥引起了廣大學(xué)者的興趣。為此本學(xué)位論文主要做了以下工作:
1、利用毛細(xì)管電泳技術(shù),結(jié)合酶微反應(yīng)器從中草藥和食品中間篩選沒有副作用的篩選ACEI。將ACE直接固定在整體基質(zhì)上,制成了酶微反應(yīng)器,結(jié)合毛細(xì)管電泳在線分離,篩選ACEI.制備了將酶直接共價(jià)固定于整體基質(zhì)的AC
4、E微反應(yīng)器,考查卡托普利,賴諾普利,和各種中草藥提取物的抑制作用,從中草藥中篩選出沒有副作用的新抗高血壓藥。通過篩選發(fā)現(xiàn)山楂,決明子,槐米等水提物有一定的抑制效果,分別得出了其抑制率。
2、毛細(xì)管電泳分析肽和蛋白質(zhì)時(shí),由于肽和蛋白質(zhì)的表面的不均一性,肽和蛋白質(zhì)特別是堿性蛋白/肽易于被毛細(xì)管壁吸附,使結(jié)果到了一個(gè)不能接受的水平。針對(duì)這種情況,本文建立了高效毛細(xì)管電泳快速分離IgG等蛋白質(zhì)及肽的方法。用化學(xué)共價(jià)改性毛細(xì)管成功抑
5、制了堿性蛋白及肽在空白毛細(xì)管上的吸附,實(shí)現(xiàn)了毛細(xì)管電泳對(duì)蛋白樣品的高效的分離、得到了較高的蛋白回收率、良好的重現(xiàn)性。較非共價(jià)包覆毛細(xì)管有穩(wěn)定性高,更寬的pH范圍等優(yōu)點(diǎn)。
3、建立簡(jiǎn)單、快速測(cè)定冬蟲夏草和人工蛹蟲草子實(shí)體中蟲草素、腺嘌呤、鳥嘌呤、尿嘧啶、次黃嘌呤、腺苷、鳥苷、尿苷、次黃苷9種核苷及堿基成分的高效毛細(xì)管區(qū)帶電泳法,比較天然冬蟲夏草與人工蛹蟲草子實(shí)體中核苷類化合物的含量。采用未涂層彈性石英毛細(xì)管,以硼砂-硼酸溶液
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