血紅素加氧酶—1的表達(dá)在實(shí)驗(yàn)性肝硬化內(nèi)毒素血癥中的作用.pdf

1、目的：從誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)源性氧化于抗氧化保護(hù)系統(tǒng)的角度，初步探討血紅素加氧酶-1(hemeoxygenase-1，HO-1)及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)的表達(dá)對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝硬化內(nèi)毒素血癥大鼠的影響。 方法：硫代乙酰胺(TAA)誘導(dǎo)肝硬化模型時(shí)間共計(jì)10周。40只健康雄性Wistar大鼠，體重(300±20)g(由山西醫(yī)科大學(xué)生理教研室提供)。隨機(jī)分為5組：正常+LPS(對(duì)照組)

2、、肝硬化+生理鹽水對(duì)照組(TAA組)、肝硬化+LPS組(TAA+LPS組)、肝硬化+LPS+AG(AG組)、肝硬化+LPS+hemin組(HM組)。除對(duì)照組外，其余各組自由飲加有硫代乙酰胺(TAA)的水，0.03％的TAA水誘導(dǎo)飼喂5周時(shí)間，再改為0.04％的TAA水誘導(dǎo)飼喂5周。于模型造成后，除TAA組外其余各組向腹腔內(nèi)注入LPS3mg/kg，TAA組給等容量的生理鹽水；HM組于注射LPS前12小時(shí)，腹腔注射HM(40mg/kg)；A

3、G組于注射LPS3h后，腹腔注射AG(50mg/kg)。并在注入LPS6小時(shí)后，7％水合氯醛5ml-kg，腹腔注射麻醉，各組動(dòng)物經(jīng)腹主動(dòng)脈穿刺采全血。取血后，迅速取出肝臟，沖凈余血，將肝組織組織迅速投入4％的多聚甲醛中浸泡固定24小時(shí)，做石蠟切片以備用。采用常規(guī)生化法測(cè)血漿中天門冬氨基酸轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)；硫代巴比妥酸法(TBA)測(cè)血漿中MDA含量：用硝酸還原酶法測(cè)血漿NO濃度，按試劑盒說明操作。用免疫組織化學(xué)

4、SABC法檢測(cè)肝組織HO-1，iNOS表達(dá)和分布，并用BI-2000型計(jì)算機(jī)圖象分析軟件對(duì)HO-1和iNOS表達(dá)進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果：(1)HO-1的蛋白表達(dá)：方差分析表明：對(duì)照組、TAA、AG組、TAA+LPS、HM組各組大鼠的灰階值顯著依次降低，且有明顯得差別(P<0·05)；(2)iNOS的蛋白表達(dá)：對(duì)照組、TAA組、AG組、TAA+LPS組、HM組的iNOS灰階值可以看出：各組肝組織中iNOS灰的表達(dá)依次降低，且有明顯

5、得差別(P<0·05)。(3)對(duì)照組、TAA組、AG組、TAA+LPS組、HM組的血漿中的NO、ALT/AST依次升高，且各組之間有明顯得差別(P<0·05)；對(duì)照組、TAA+LPS組、HM組的血漿中的MDA依次升高，且各組之間有明顯得差別(P<0·05)；TAA與AG組血漿中的MDA變化不明顯，之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0·05)。 結(jié)論：HO-1的高表對(duì)實(shí)驗(yàn)性的肝硬化內(nèi)毒素血癥有損傷作用，其機(jī)制可能誘導(dǎo)iNOS/NO，從而使