胰腺癌高轉(zhuǎn)移、易伴發(fā)糖尿病相關(guān)機制的研究.pdf

1、近幾年，全球胰腺病的發(fā)病率和致死率漸增，在歐美，胰腺癌已經(jīng)是排名第四、五位的高致死率的惡性腫瘤。此課題主要針對其高轉(zhuǎn)移及易伴發(fā)糖尿病的特點進行相關(guān)機制的研究。 第一部分：胰腺癌高轉(zhuǎn)移相關(guān)因子Sixl的表達研究 目的：從前期雙向電泳結(jié)果中的篩選出的候選腫瘤標記物中進一步篩選出與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白。找到其上游調(diào)控分子，并進行進一步研究，分析其表達與胰腺癌的關(guān)系及其臨床生物學意義。 方法：采用免疫組織化學的方法對候選腫

2、瘤標記物進行篩選，并用組織芯片及免疫印跡技術(shù)進行驗證。進而采用免疫印跡及免疫組織化學技術(shù)，檢測其上游調(diào)控蛋白在4株胰腺癌細胞系及3T3細胞系的表達和其在胰腺癌、良性腺瘤、胰腺炎及癌旁組織中的表達。 結(jié)果：免疫組化結(jié)果顯示，與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的Ezrin蛋白在胰腺癌細胞及組織中表達顯著上調(diào)（P<0.05）。免疫印跡結(jié)果顯示，Ezrin的調(diào)控蛋白Sixl在Bxpc-3和CFPAC-1細胞株中的表達明顯增強；并且在胰腺癌組織和良性腺瘤組織

3、的表達也顯著高于癌旁組織。免疫組化結(jié)果顯示，34例（85.0％）胰腺癌組織、3例（75.0％）良性腺瘤組織、6例（60.0％）胰腺炎和癌旁組織中Sixl表達陽性；其陽性表達與腫瘤大小和遠處轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)（P<0.05）。 結(jié)論：Ezrin與胰腺癌腫瘤轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。上游調(diào)控蛋白Sixl表達是胰腺癌發(fā)生的早期事件，可能導致腫瘤向惡性發(fā)展；其表達水平與腫瘤大小及遠處轉(zhuǎn)移有關(guān)。 第二部分：胰腺癌易伴發(fā)糖尿病相關(guān)機制的蛋白質(zhì)組學研究

4、 目的：發(fā)現(xiàn)可能的胰腺癌-糖尿病相關(guān)因子，并對發(fā)現(xiàn)的蛋白進行進一步驗證與初步的分子生物學研究。 方法：采用人胰腺腫瘤細胞PANC-1的條件培養(yǎng)基（CM）刺激大鼠胰島β細胞INS-1來模擬體內(nèi)狀態(tài)，通過差異熒光雙向電泳的方法分析了INS-1胰島β細胞在對CM刺激前后蛋白表達譜的變化。并對候選蛋白進行免疫印跡及免疫組化驗證。 結(jié)果：發(fā)現(xiàn)并驗證了5個與胰腺癌細胞刺激有關(guān)的蛋白，HSP60，Peripherin和Prp1