血管緊張素Ⅱ受體活性對(duì)骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、第一章血管緊張素Ⅱ受體活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用
　　 研究背景：骨骼肌微循環(huán)是血漿和組織間液之間物質(zhì)交換的場(chǎng)所，骨骼肌微循環(huán)灌注量的改變對(duì)物質(zhì)交換起直接調(diào)節(jié)作用。腎素-血管緊張素(Renin-angiotensin system，RAS)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)血管張力及血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用，血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是RAS系統(tǒng)的主要生物活性物質(zhì)，主要通過與其1型受體(AT1R)和2型受體(AT2R)結(jié)合發(fā)揮

2、作用，AngⅡ?qū)T1R和AT2R具有相似的親和力。在大容量血管及阻力小動(dòng)脈，AT1R激活介導(dǎo)血管收縮，而AT2R激活可介導(dǎo)血管舒張。AT1R和AT2R在骨骼肌微循環(huán)中分布廣泛，AT1R活性及AT2R活性是否對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注起調(diào)節(jié)作用，并進(jìn)而影響骨骼肌葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)，目前并不完全清楚。
　　 目的：給予AT1R拮抗劑氯沙坦和/或AT2R拮抗劑PD123319，觀察基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌循環(huán)灌注情況的變化，以明確AT

3、1R活性及AT2R活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下骨骼肌微循環(huán)灌注的調(diào)節(jié)作用，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步觀察AT1R活性及AT2R活性對(duì)骨骼肌攝取胰島素和利用葡萄糖的影響。
　　 方法：(1)骨骼肌微循檢測(cè)實(shí)驗(yàn):SD大鼠（20只）隨機(jī)分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，運(yùn)用造影增強(qiáng)超聲技術(shù)(Contrast-enhancedultrasound，CEU)檢測(cè)各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(M

4、icrovascularblood volume，MBV)的變化;
　　 (2)股動(dòng)脈血流檢測(cè)實(shí)驗(yàn):SD大鼠（10只），隨機(jī)分為氯沙坦給藥組和PD123319給藥組，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過程中股動(dòng)脈血流變化;
　　 (3)骨骼肌葡萄糖利用測(cè)定實(shí)驗(yàn):SD大鼠（20只）隨機(jī)分為氯沙坦給藥組、PD123319給藥組、氯沙坦+PD123319給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，測(cè)定大鼠下肢動(dòng)靜脈葡萄糖差值以明確骨骼肌葡萄糖利用情況;

5、　　 (4)骨骼肌胰島素?cái)z取實(shí)驗(yàn):SD大鼠（15只），隨機(jī)分為對(duì)照組、氯沙坦給藥組、氯沙坦+L-NAME給藥組，測(cè)定125-Ⅰ胰島素的清除率以明確骨骼肌胰島素?cái)z取情況。
　　 結(jié)果：(1) AT1R拮抗劑氯沙坦給藥后，與基礎(chǔ)值相比，大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量顯著增加約3倍(p＜0.001)，伴隨骨骼肌葡萄糖利用和胰島素?cái)z取的明顯增加(p＜0.05)。氯沙坦給藥不影響股動(dòng)脈血流及動(dòng)脈血壓。
　　 (2) AT2R拮抗劑PD1

6、23319給藥后，與基礎(chǔ)值相比，大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量降低約80％(p＜0.001)，伴隨骨骼肌葡萄糖利用明顯下降(p＜0.01)。PD123319給藥不影響股動(dòng)脈血流及動(dòng)脈血壓。
　　 (3)在同時(shí)給予AT2R拮抗劑PD123319的情況下，氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量及葡萄糖攝取的作用被抑制（與基礎(chǔ)值相比， p＞0.05)。
　　 (4)一氧化氮合成酶抑制劑L-NAME抑制一氧化氮產(chǎn)生后，氯沙坦增加骨骼肌微循環(huán)灌注量

7、、葡萄糖利用及胰島素?cái)z取的作用均被抑制（與基礎(chǔ)值相比，p＞0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 (1)基礎(chǔ)AT1R活性限制骨骼肌微循環(huán)灌注量，并進(jìn)而影響骨骼肌葡萄糖利用和胰島素?cái)z取;基礎(chǔ)AT2R活性可增加骨骼肌微循環(huán)灌注量，從而增加骨骼肌葡萄糖利用和胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)。
　　 (2) AT1R阻滯后增加骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用和胰島素?cái)z取的作用，由AT2R介導(dǎo)，并依賴于一氧化氮的作用。
　　 第二章血管緊張素Ⅱ受

8、體活性對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下大鼠骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性的調(diào)節(jié)作用
　　 研究背景：骨骼肌是胰島素調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要場(chǎng)所，在作用于骨骼肌細(xì)胞之前，胰島素必須首先從循環(huán)血液中轉(zhuǎn)運(yùn)至骨骼肌組織間隙，胰島素的轉(zhuǎn)運(yùn)是決定其在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)葡萄糖代謝作用的限速步驟。在正常狀態(tài)下，胰島素可擴(kuò)張毛細(xì)血管前終末小動(dòng)脈，增加骨骼肌微循環(huán)灌注，擴(kuò)大物質(zhì)交換面積，促進(jìn)其自身轉(zhuǎn)運(yùn)作用。骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性正常，是保證胰島素調(diào)節(jié)糖代謝作用正常發(fā)揮的基礎(chǔ)。血

9、管緊張素系統(tǒng)(RAS)的過度激活影響胰島素在骨骼肌中發(fā)揮調(diào)節(jié)糖代謝的能力，RAS系統(tǒng)對(duì)于骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性是否有影響，目前尚無直接證據(jù)。我們?cè)诘谝徽聦?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)狀態(tài)下，AT1R和AT2R活性對(duì)骨骼肌微循環(huán)灌注、葡萄糖利用及胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)具有調(diào)節(jié)作用。由于骨骼肌微循環(huán)灌注、胰島素轉(zhuǎn)運(yùn)與微循環(huán)胰島素敏感性及胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力密切相關(guān)，我們推測(cè)AT1R和AT2R活性可能對(duì)微循環(huán)胰島素敏感性發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，并進(jìn)而影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能

10、力。
　　 目的：觀察基礎(chǔ)狀態(tài)下AT1R和AT2R活性對(duì)胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力的影響。
　　 方法：(1)胰島素微循環(huán)作用和調(diào)節(jié)糖代謝能力實(shí)驗(yàn):SD大鼠（15只）隨機(jī)分為對(duì)照組，氯沙坦給藥組和PD123319給藥組。對(duì)照組大鼠接受2小時(shí)胰島素鉗夾實(shí)驗(yàn)(3mU/kg.min)，氯沙坦組大鼠在接受胰島素鉗夾試驗(yàn)同時(shí)給予氯沙坦靜脈注射以阻滯AT1R活性，PD123319組鼠在接受胰島素鉗夾試驗(yàn)同時(shí)給予PD123319

11、持續(xù)輸注以阻滯AT2R活性。計(jì)算胰島素刺激的葡萄糖處置率(Glucoseinfusion rate，GIR)，用于評(píng)價(jià)胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力;運(yùn)用造影增強(qiáng)超聲技術(shù)（Contrast-enhanced ultrasound，CEU）檢測(cè)各組大鼠骨骼肌微循環(huán)灌注量(MBV)的變化，用于評(píng)價(jià)微循環(huán)胰島素敏感性;整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中監(jiān)測(cè)動(dòng)脈血壓;
　　 (2)股動(dòng)脈血流檢測(cè)實(shí)驗(yàn):SD大鼠（15只），分組及處理同上，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過程中股動(dòng)脈血流變化

12、。
　　 結(jié)果(1)對(duì)照組大鼠中，隨著胰島素的輸注，GIR逐漸升高，同時(shí)可觀察到MBV的增加，與基礎(chǔ)值相比MBV增加約1.5-2倍(P＜0.05)。
　　 (2)在胰島素輸注的情況下，給予氯沙坦后可觀察到MBV進(jìn)一步升高，與基礎(chǔ)值相比升高約3倍(P＜0.05);與對(duì)照組大鼠相比，氯沙坦給藥對(duì)GIR沒有進(jìn)一步影響(P＞0.05)。
　　 (3)在胰島素輸注的情況下同時(shí)給予PD123319輸注，可觀察到胰島素增加MB

13、V的作用消失(P＞0.05，與基礎(chǔ)值相比);伴隨GIR顯著降低，與對(duì)照組大鼠相比， PD123319給藥后GIR下降約30％(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：(1)基礎(chǔ)AT1R和AT2R活性影響胰島素調(diào)節(jié)糖代謝的能力，AT1R活性限制胰島素刺激的骨骼肌處理葡萄糖的能力，AT2R活性對(duì)于胰島素正常調(diào)節(jié)糖代謝是必需的;
　　 (2)基礎(chǔ)AT1R和AT2R活性影響骨骼肌微循環(huán)胰島素敏感性，AT1R活性限制胰島素增加骨骼肌微循環(huán)灌