腺苷A2A受體激動劑緩解小鼠DSS結(jié)腸炎及機制研究.pdf

1、背景：
　　潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是炎癥性腸病（IBD）的一種，其以結(jié)腸及直腸部位出現(xiàn)不受控制的炎癥反應(yīng)為特點。傳統(tǒng)治療不能有效緩解病情及阻止其復(fù)發(fā)，且可能會引起嚴重的副作用。因此，我們亟需探索治療UC的新方法。新近研究顯示，激活腺苷A2A受體可發(fā)揮抗炎作用及免疫抑制作用，然而，A2A受體調(diào)節(jié)腸道免疫反應(yīng)及可能的機制尚待深入研究。
　　目的：
　　探討腺苷A2A受體激動劑調(diào)節(jié)葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎腸道炎癥反

2、應(yīng)及可能的機制。
　　方法：
　　將Balb/c小鼠隨機分成4組：正常對照組，DSS組，DSS+CGS21680組，DSS+CSC組。自實驗第一天開始，給小鼠飲用4％DSS建立急性結(jié)腸炎模型。自實驗第3天開始，對DSS+CGS21680組、DSS+CSC組小鼠每天分別給予CGS216801mg/kg、CSC2.5mg/kg腹腔注射至第7天。每天觀察各組小鼠疾病活動指數(shù)（DAI），第8天處死小鼠，取結(jié)腸組織行HE染色評估結(jié)腸嚴

3、重程度，免疫組化測定組織中CD68及pNF-κB p65的表達，組織勻漿檢測各組小鼠結(jié)腸MPO的含量，ELISA檢測TNF、IL-1β的表達量。
　　結(jié)果：
　　1．DAI評分：第7天各組小鼠DAI評分，DSS+CGS21680組DAI評分（1.57±0.65）明顯低于DSS組（3.10±0.47）與DSS+CSC組（3.07±0.21）DAI評分（P<0.05），對照組DAI評分為0，各組與對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0

4、.05）。
　　2.組織病理學(xué)評分：DSS+CGS21680組組織病理學(xué)評分為1.80±0.79，明顯低于DSS組（3.10±0.74）與DSS+CSC組（3.00±0.82）組織病理學(xué)評分（P<0.05）。對照組組織病理學(xué)評分為0，各組與對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　3．MPO活性：DSS組與DSS+CSC組MPO活性較正常組明顯增高（P<0.05），其活性分別為9.91±1.66U/g、10.96±1.

5、28U/g。DSS+CGS21680組 MPO活性（7.72±0.67U/g）明顯比DSS組和DSS+CSC組低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　4．組織勻漿TNF含量：DSS組與DSS+CSC組TNF表達水平結(jié)果分別為270.77±57.55pg/g與265.88±69.35pg/g較正常組明顯增高（P<0.05）。DSS+CGS21680組TNF表達水平（138.47±40.46pg/g）明顯比DSS組和DSS+CSC組

6、低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　5.組織勻漿IL-1β含量：檢測各組IL-1β的表達水平，DSS組和DSS+CSC組IL-1β表達水平較正常組明顯增高（P<0.05），各組值分別為176.88±55.84pg/g，196.52±47.80pg/g。DSS+CGS21680組IL-1β表達水平（54.71±36.22pg/g）明顯比DSS組和DSS+CSC組低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　6．結(jié)腸組織pNF

7、-κB p65的表達：對照組小鼠結(jié)腸粘膜中陽性細胞幾乎沒有，而DSS組與DSS+CSC組pNF-κB p65陽性細胞數(shù)分別為68.34±11.55與70.74±10.74。DSS+CGS21680組pNF-κB p65陽性細胞數(shù)明顯低于DSS組與DSS+CSC組，只有42.12±12.47，與DSS組或DSS+CSC組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　7．結(jié)腸組織CD68的表達：對照組小鼠結(jié)腸組織中僅有極少量或基本沒有CD