通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方提高特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化患者活動(dòng)耐力及作用機(jī)理的研究.pdf

1、研究背景：
　　特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(IPF)是最常見的特發(fā)性間質(zhì)性肺炎，其發(fā)病機(jī)制不明，且起病隱匿，臨床可見進(jìn)行性加重的呼吸困難，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量及預(yù)后。目前多數(shù)研究認(rèn)為，肺泡上皮細(xì)胞損傷、成纖維細(xì)胞灶的形成以及細(xì)胞外基質(zhì)過度沉積是IPF的主要病理特征，最終肺泡結(jié)構(gòu)破壞，形成肺泡腔內(nèi)完全性纖維化和囊泡狀的蜂窩肺，導(dǎo)致肺功能持續(xù)性和進(jìn)行性損害。IPF的治療目前尚無任何有效的藥物，只有長(zhǎng)期氧療屬于強(qiáng)推薦。近十幾年來，我們通過臨床觀

2、察發(fā)現(xiàn)，IPF的病因病機(jī)多為正虛標(biāo)實(shí)，認(rèn)為宗氣虛陷是其發(fā)生的始動(dòng)因素，肺絡(luò)痹阻貫穿于疾病的始終，宗氣虛陷使氣血津液運(yùn)行障礙，進(jìn)而形成痰濁瘀血內(nèi)阻。發(fā)病早期外邪痹阻，隨著病邪深入，與內(nèi)生痰瘀結(jié)合，痰瘀進(jìn)一步痹阻肺絡(luò)，終至肺絡(luò)痹阻、宗氣虛陷的病因病機(jī)，臨床采用疏通肺絡(luò)、破血祛痰、升補(bǔ)宗氣的通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方治療IPF初步取得較好的療效。為進(jìn)一步觀察其對(duì)患者活動(dòng)耐力的影響，并探討其分子生物學(xué)作用機(jī)理，本文進(jìn)行了隨機(jī)、空白對(duì)照、前瞻性臨床試驗(yàn)和動(dòng)物

3、實(shí)驗(yàn)。
　　一、通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方提高特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化患者活動(dòng)耐力的臨床研究
　　目的:觀察通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方在提高特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(IPF)患者活動(dòng)耐力方面的療效及安全性。
　　方法:收集中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院門診符合納入標(biāo)準(zhǔn)的IPF患者60例，隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組各30例，其中對(duì)照組采用大劑量N-乙酰半胱氨酸治療，觀察組采用通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方加大劑量N-乙酰半胱氨酸治療，療程3個(gè)月，隨訪3個(gè)月。比較兩組患者治療前后

4、6分鐘步行試驗(yàn)、圣·喬治生活質(zhì)量調(diào)查問卷、肺功能、中醫(yī)證候、呼吸困難及咳嗽單項(xiàng)癥狀的變化;并比較隨訪結(jié)束時(shí)與治療后患者中醫(yī)證候、呼吸困難及咳嗽單項(xiàng)癥狀和6分鐘步行試驗(yàn)的變化。記錄兩組患者的不良反應(yīng)。
　　結(jié)果:6分鐘步行試驗(yàn):觀察組患者治療后較治療前6分鐘步行距離延長(zhǎng)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)照組患者治療后6分鐘步行距離較治療前縮短，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組患者治療前后6分鐘步行距離差距比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，觀察組明顯長(zhǎng)于對(duì)照組

5、;圣·喬治生活質(zhì)量調(diào)查問卷:圣·喬治生活質(zhì)量綜合評(píng)定，觀察組與對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;治療前后癥狀評(píng)分比較，觀察組治療后癥狀評(píng)分較治療前下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)照組治療后癥狀評(píng)分較治療前增高，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，兩組患者治療前后癥狀評(píng)分差值比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，觀察組優(yōu)于對(duì)照組;在活動(dòng)受限及心理狀況方面，觀察組及對(duì)照組治療前后比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而治療前后分?jǐn)?shù)差值兩組之間比較亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肺功能:患者肺功能總體療效及肺總量(T

6、LC)、肺活量(VC)、一氧化碳彌散量(DLCO)單項(xiàng)療效比較，兩組患者治療前后比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而兩組患者治療前后分?jǐn)?shù)差值比較亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;中醫(yī)證候療效方面:兩組之間中醫(yī)證候療效比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，觀察組優(yōu)于對(duì)照組;呼吸困難癥狀:兩組患者呼吸困難積分治療前后差值比較，觀察組優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.01);咳嗽癥狀:咳嗽積分治療前后差值兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，觀察組優(yōu)于對(duì)照組;隨訪3月時(shí)與治療后比較，在中

7、醫(yī)證候積分、呼吸困難、咳嗽及6分鐘步行試驗(yàn)方面均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;安全性比較:兩組患者均無嚴(yán)重不良事件出現(xiàn)。
　　結(jié)論:通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方能明顯提高患者的活動(dòng)耐力、改善患者生活質(zhì)量及穩(wěn)定患者肺功能的下降，并且能夠減輕患者呼吸困難及咳嗽癥狀。
　　二、通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方治療特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化作用機(jī)理的研究
　　臨床試驗(yàn):
　　目的:通過IPF患者治療前后血清轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、結(jié)締組

8、織生長(zhǎng)因子(CTGF)、血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF-AA)水平的變化，揭示通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方治療IPF患者的部分分子生物學(xué)作用機(jī)制，并以這一客觀指標(biāo)判斷其療效。
　　方法:上述兩組特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化患者中完成試驗(yàn)的前15例患者進(jìn)入本研究，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定患者治療前后血清TGF-β、TNF-α、CTGF、PDGF-AA含量，比較兩組患者治療前后血清TGF-β、TNF-α、CTGF、PDGF-AA水平的變化，并進(jìn)行統(tǒng)

9、計(jì)學(xué)處理。
　　結(jié)果:觀察組能明顯降低TGF-β的水平，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);兩組患者治療前后TNF-α、CTGF水平無明顯變化;PDGF-AA治療后反比治療前上升，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方治療IPF患者的作用機(jī)理可能與下調(diào)IPF患者血清TGF-β水平有關(guān)。
　　動(dòng)物實(shí)驗(yàn):
　　目的:通過觀察通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方對(duì)實(shí)驗(yàn)性肺纖維化大鼠肺組織Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、TGF-β、Smad3及

10、Smad7水平的影響，并揭示各個(gè)指標(biāo)之間的關(guān)系，探討通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方治療肺間質(zhì)纖維化的分子生物學(xué)作用機(jī)制。
　　方法:應(yīng)用HE染色觀察通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方及N-乙酰半胱氨酸對(duì)肺纖維化大鼠肺泡炎及肺纖維化程度的影響;采用Masson染色觀察通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方及N-乙酰半胱氨酸對(duì)肺纖維化大鼠氣道上皮損傷程度評(píng)分、膠原沉積及氣道壁厚度的影響;采用免疫印跡法觀察通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方及N-乙酰半胱氨酸對(duì)肺纖維化大鼠肺組織Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、TGF-β、Sma

11、d3、Smad7含量的影響;并觀察各個(gè)指標(biāo)之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方和N-乙酰半胱氨酸組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度均較模型組明顯減輕;與模型組比較，通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方和N-乙酰半胱氨酸組大鼠上皮損傷程度明顯減輕(P＜0.01)、膠原沉積面積明顯減少(P＜0.01)、氣管壁厚度明顯變薄(P＜0.01)，但通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣組與乙酰半胱氨酸組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);與模型組比較，通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方和乙酰半胱氨酸組的大鼠肺組織

12、中Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、TGF-β、Smad3水平均明顯下降(P＜0.01)，其余各組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);與模型組比較，通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方和N-乙酰半胱氨酸組的大鼠肺組織中Smad7水平均上升(P＜0.01)，其余各組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。TGF-β和Ⅰ、Ⅲ型膠原表達(dá)呈正相關(guān)，TGF-β與Smad3的表達(dá)呈正相關(guān)，與Smad7的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論:通肺絡(luò)補(bǔ)宗氣方能夠降低TGF-β水平，從而下調(diào)Sm