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1、目的:研究高糖作用下的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和正常培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞microRNA的差異表達(dá)譜。
方法:利用microRNA芯片技術(shù)(此芯片包含人類所有成熟microRNA及microRNA前體序列)篩選出高糖培養(yǎng)基(正常培養(yǎng)基添加葡萄糖至最終糖濃度為30.5mmol/L)培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞相對(duì)于正常培養(yǎng)基(M199添加10%胎牛血清,糖濃度為5.5mmol/L)培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞差異表達(dá)的microRNA。然后采用實(shí)
2、時(shí)熒光定量PCR技術(shù)驗(yàn)證microRNA芯片結(jié)果的可靠性。
結(jié)果:通過(guò)microRNA芯片篩選發(fā)現(xiàn)有95個(gè)microRNAs在高糖組人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞和正常組人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞之間差異表達(dá),其中高糖組相對(duì)于正常組有61個(gè)microRNAs高表達(dá),34個(gè)microRNAs低表達(dá)。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR驗(yàn)證結(jié)果證明microRNA芯片結(jié)果是可靠的。
結(jié)論:我們研究發(fā)現(xiàn)在高糖作用下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中microRNA的表達(dá)譜會(huì)發(fā)
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