2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:近年來,脊髓損傷(SCI)在我國的發(fā)病率越來越高,究其原因與交通、建筑等行業(yè)高速發(fā)展不無關系。其高致殘率給社會與個人帶來沉重的經濟及心理負擔,尤其是脊髓橫斷性損傷,神經功能的恢復幾乎無望。如何使離斷的脊髓得到有效連接,使受損的神經元功能得到恢復是醫(yī)學界急需解決的難題。隨著組織工程學的飛速發(fā)展,一種更先進的SCI修復理念逐步形成,即對SCI的有效治療必須重建軸突與靶細胞間的連接才有根本意義,而組織工程支架植入或許是最有可能達到這一理

2、想要求的有效途徑。為此,擬應用幼年家犬脊髓經化學萃取方法制作的一種新型神經生物支架,觀察人臍帶間充質干細胞(hUCMSCs)被注入到此支架內的生長情況,為該支架聯(lián)合人臍帶MSCs移植在完全橫貫性脊髓損傷動物模型及臨床應用奠定基礎。 方法: 1、神經生物支架的制備:切取幼犬胸段脊髓長約5cm,浸入40ml/LTritonX-100的蒸餾水溶液在4℃冰箱中過夜;蒸餾水浸浴3h后放入40mM/L脫氧膽酸鈉蒸餾水溶液中,置4℃冰

3、箱12h。以上步驟共重復3次。萃取后的脊髓支架置4℃冰箱備用。 2、人臍帶間充質干細胞培養(yǎng):取足月妊娠剖宮產健康胎兒的臍帶,以PBS充分沖洗,剔除臍帶動、靜脈,將其余的臍帶間質組織切割成直徑約1mm大小的組織塊,在含有20%的胎牛血清、2mM左旋谷氨酰氨(L-Glu)、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的高糖型培養(yǎng)基(HG-DMEM)中培養(yǎng)。原代培養(yǎng)5-7天后,顯微鏡下可見大量細胞自組織塊中游出,向外呈放射狀貼壁生長。

4、待細胞達到80%-90%匯合后,加入0.2%胰酶消化傳代。收集第三代人臍帶MSCs行流式細胞學檢測細胞表面抗原證實其為臍帶間充質干細胞后凍存?zhèn)溆谩?3、凍存的人臍帶MSCs復蘇與神經生物支架相容性研究:對凍存的人臍帶MSCs復蘇使細胞密度達到1×106/ml,用微量注射器分點注入支架內,置入含有BDNF、bFGF、NGF的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng),培養(yǎng)時間分別為48、72、96小時,應用冰凍切片及Hitachi掃描、透射電鏡觀察人臍

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