封管用枸櫞酸鈉注射液的研制.pdf

1、對于需要長期血液透析的患者，常在頸靜脈、股靜脈及鎖骨下靜脈處插入單針雙腔導管(又稱中心靜脈插管、靜脈留置導管)，以減少每次插管的不便和疼痛。然而，血液透析過程中經常面臨留置導管發(fā)生凝血堵塞與感染的困擾，影響其使用壽命和患者安全。目前，臨床上對靜脈留置導管進行封管常采用肝素鈉注射液或肝素鈉注射液配合抗生素聯(lián)合使用，但該法不宜應用于有明顯出血傾向、凝血功能障礙及使用肝素鈉注射液過敏的血液透析患者，而且頻繁使用抗生素會產生耐藥性，更易引發(fā)感染

2、。因此，選擇一種良好的封管液對靜脈留置導管的推廣應用非常重要。根據文獻報道高濃度的枸櫞酸鈉溶液兼有抗凝血與抗感染的作用，并在歐洲已被用作靜脈留置導管的封管。本研究旨在研制開發(fā)一種封管用的枸櫞酸鈉注射液，以滿足國內臨床的需要。 本研究首次建立了體外中心靜脈插管仿真裝置。以純化水、硅膠管及橡膠管模擬血液與血管，利用虹吸原理與蠕動裝置作為驅動力，在硅膠管上插入靜脈留置導管，組裝成體外中心靜脈插管仿真裝置，并通過該裝置研究封管液在留置導

3、管中的滯留情況。該裝置設計合理，操作簡便，重現(xiàn)性良好，適合用于封管液的處方篩選及封管液在留置導管中滯留期的觀察，為新型封管液的臨床前研究提供了一個試驗平臺。利用該仿真裝置測得本研究制備的封管液在留置導管中可滯留72小時以上，能滿足臨床的需求。 本研究利用體外中心靜脈插管仿真裝置，對封管用枸櫞酸鈉注射液的配方進行了篩選，包括pH值調節(jié)劑及增稠劑的優(yōu)化實驗，通過均勻設計方法，并結合體外溶血性試驗結果及考慮其他因素，篩選出制劑最佳處方

4、為：枸櫞酸鈉464g，枸櫞酸3g，注射用水加至1000ml。制備工藝為水針劑常規(guī)工藝，制成規(guī)格為3ml：1.4g的封管用枸櫞酸鈉注射液。該制劑采用國產原料藥，制備工藝簡單，適合于工業(yè)化生產。 本研究參照中國藥典2005年版二部附錄XIX C藥物制劑穩(wěn)定性試驗指導原則，將三批封管用枸櫞酸鈉注射液分別置于40℃±2℃條件下6個月和25℃±2℃條件下18個月進行穩(wěn)定性考察。結果表明，封管用枸櫞酸鈉注射液有良好的穩(wěn)定性，對光反應不敏感，

5、40℃±2℃條件下6個月無明顯變化，制劑使用期限在18個月以上。本研究建立了高效液相法(HPLC)測定該制劑中的枸櫞酸鈉含量的方法。選用迪馬 Diamonsil C<,18>色譜柱，以50mmol/L磷酸二氫鉀-甲醇(用磷酸調pH至2.5～2.8)(95:5，v:v)為流動相，流速為1.0ml/min，紫外檢測波長為210nm，枸櫞酸鈉在0.5mg/ml～6mg/ml范圍內呈良好的線性關系(r=0.9999，n=5)；平均加樣回收率為9

6、8.47％(RSD=0.94％)；測得三批封管用枸櫞酸鈉注射液中的枸櫞酸鈉含量分別為標示量的99.57％、96.79％、98.07％。該法操作簡便、快速，結果準確、可靠，適用于該制劑中枸櫞酸鈉的含量測定。本研究起草了封管用枸櫞酸鈉注射液的質量標準(草案)及起草說明。 本課題對封管用枸櫞酸鈉注射液進行了體外抗凝血試驗，以新鮮兔血為實驗材料，以肝素鈉注射液為對照物，采用血液凝聚儀測定供試品和對照品的血小板最大聚集率(PAGm)、部分

7、凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)及凝血酶時間(TT)。結果表明，封管用枸櫞酸鈉注射液能夠明顯延長兔血體外AFTT、PT及TT，可以完全抑制血小板的凝聚，其體外抗凝血作用總體上不弱于肝素鈉注射液，并在抑制血小板聚集率方面優(yōu)于后者。 本課題對封管用枸櫞酸鈉注射液進行了體外抑菌試驗。采用瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法測定封管用枸櫞酸鈉注射液對204株標準及臨床分離菌株的最低抑菌濃度(MIC)，以瓊脂打洞擴散法與目前臨床封管用的肝

8、素鈉注射液進行抑菌效果比較。結果表明，封管用枸櫞酸鈉注射液對金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginsa)及白色念珠球菌(Candida albicans)的最小抑菌濃度范圍分別為58.4～7.3mg/ml、29.2～7.3mg/ml、233.5～116.

9、8 mg/ml、233.5～58.4mg/ml及58.4～29.2 mg/ml。也就是說，封管用枸櫞酸鈉注射液對留置導管感染中常見的病原菌具有良好的抑制作用。另外，通過瓊脂打洞擴散法證明了肝素鈉注射液對上述病原菌無抑菌作用。 本研究通過體外溶血性試驗與小鼠急性毒性試驗對該制劑的安全性進行了考察。依照《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》，取規(guī)定量藥物加入2％兔血生理鹽水混懸液中，觀察溶血和凝集情況，并用分光光度計測定

10、吸光度值，計算溶血率。試驗結果表明，含0.3％枸櫞酸的封管用枸櫞酸鈉注射液(pH 6.9)無明顯溶血現(xiàn)象，測得其溶血率小于5％，符合注射劑要求。而含4％枸櫞酸的封管液(pH 5.6)溶血率達14.5％，不符合注射劑要求。本試驗選擇小鼠尾靜脈注射給藥方式，進行封管用枸櫞酸鈉注射液對小鼠的急性毒性試驗。結果表明，小鼠尾靜脈給藥半數(shù)致死量(ID<,50>)為0.305g/kg，僅為推薦使用劑量的10～20倍。故應嚴禁將封管用枸櫞酸鈉注射液直接

11、注入體內，封管使用時應嚴格控制其用量與給藥速度。在對封管用枸櫞酸鈉注射液進行安全性評價基礎上，選擇上海長征醫(yī)院血透室尿毒癥維持透析并需長期留置導管患者40例，對該藥在血透患者長期留置導管的封管效果進行初步臨床觀察。將患者隨機分為封管用枸櫞酸鈉注射液試驗組與肝素鈉注射液對照組，記錄用藥前及用藥后導管通暢情況并觀察導管相關感染情況。試驗結果顯示，封管用枸櫞酸鈉注射液的抗凝與預防感染的作用明顯優(yōu)于肝素鈉注射液，且具有較佳的安全性，該藥物的不良