表觀遺傳調(diào)節(jié)子基因TET2、ASXL1、EZH2突變與骨髓增生異常綜合征關(guān)系的研究.pdf

1、研究目的：
　　 探討表觀遺傳調(diào)節(jié)子基因(epigenetic regulator)TET2、ASXL1、EZH2與骨髓增生異常綜合征(MDS)的關(guān)系。
　　 研究方法：
　　 對(duì)153例MDS患者按2008年WHO診斷分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行回顧性診斷，隨訪患者判定預(yù)后，對(duì)使用去甲基化藥物地西他濱(Decitabine)治療的患者評(píng)價(jià)療效。應(yīng)用直接測(cè)序法檢測(cè)表觀遺傳調(diào)節(jié)子基因TET2第3～11外顯子、ASXL1第12外顯子

2、、EZH2第2～20外顯子突變狀態(tài)，克隆后測(cè)序鑒定突變類型。比較TET2、ASXL1、EZH2突變患者與野生型患者的臨床及實(shí)驗(yàn)室特征。
　　 結(jié)果：
　　 153例MDS患者中共發(fā)現(xiàn)35例(22.9％)TET2基因突變,33例(21.6%)ASXL1基因突變及8例(5.2%) EZH2基因突變患者。其中9例有ASXL1和TET2共突變,3例有ASXL1和EZH2共突變，1例有EZH2和TET2共突變。ASXL1、EZH2

3、突變患者中分別有2例和1例患者存在有兩處突變，TET2突變患者中有3例同時(shí)存在兩處突變，1例存在三處突變。ASXL1、EZH2突變均為雜合突變，TET2突變患者中有兩例患者為純和突變。三種基因突變類型均包括移碼突變、錯(cuò)義突變、無(wú)義突變，ASXL1基因以移碼突變?yōu)橹?，TET2基因以錯(cuò)義突變?yōu)橹鳌?br>　　 TET2突變患者IL-4濃度高于野生型患者(P=0.004)。ASXL1突變患者外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)中網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值較高(P=0.01

4、7)，平均紅細(xì)胞體積(MCV)較低(P=0.000)；血清VitB12水平較高(P=0.020)；骨髓細(xì)胞化學(xué)中PAS陽(yáng)性率較高(P=0.005)；干／祖細(xì)胞培養(yǎng)中紅系爆式集落(BFU-E)、紅系祖細(xì)胞集落(CFU-E)、粒．單核祖細(xì)胞集落(CFU-GM)數(shù)量均較野生型患者高(P值分別為0.049、0.011、0.006);T細(xì)胞亞群中CD3+T細(xì)胞比例、CD3+CD8+T細(xì)胞比例均較高（P值分別為0.011和0.049）。EZH2基因

5、在IPSS預(yù)后積分系統(tǒng)中較低危組（Low/Int-1）突變率2.2%（2/93），較高危組(Int-2/High)突變率11.1%(6/54)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021)。EZH2在染色體核型良好(good)組無(wú)突變患者(0)，中間（intermediate）組突變率10.3%(4/39)，不良(poor)組突變率17.6%(3/17),突變率在各組間有明顯差異(P=0.001)，EZH2突變和不良染色體核型相關(guān)。EZH2突變患

6、者外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)中網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值(Ret)較野生型患者低(P=0.040)；細(xì)胞因IL-2濃度較高(P=0.004)；有核紅PAS陽(yáng)性率及陽(yáng)性指數(shù)均較高(P值分別為0.001和0.008)。
　　 144例有完整隨訪資料的MDS患者中有23例患者轉(zhuǎn)化為白血病(16.0%)，其中急性髓系白血病(AML)-M212例，AML-M59例，AML-M62例。EZH2突變患者中位無(wú)白血病生存期18月，95%CI(11～24)個(gè)月，EZH

7、2野生型患者中位無(wú)白血病生存期108月，95%CI(94～122)個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.030)，多因素分析中，僅IPSS分組為向白血病轉(zhuǎn)化的獨(dú)立預(yù)后因素(P=0.008)。TET2、ASXL1對(duì)向白血病轉(zhuǎn)化無(wú)影響。TET2突變患者中位生存期(OS)66月，95%CI(29～103)個(gè)月，TET2野生型患者中位生存期40個(gè)月，95%CI(6-73)個(gè)月，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.041)，多因素分析中IPSS預(yù)后分組和是否

8、合并骨髓纖維化為獨(dú)立預(yù)后因素（P值分別為0.019和0.047）。ASXL1、EZH2突變對(duì)總體生存均無(wú)影響。
　　 21例使用去甲基化藥物地西他濱治療患者中RCUD-RA1例，RARS1例，RCMD5例，RAEB-17例，RAEB-27例。治療后達(dá)完全緩解(CR)或部分緩解(PR)3例；疾病穩(wěn)定(SD)8例，其中達(dá)血液學(xué)進(jìn)步(HI)3例；治療失?。‵ailure）10例。ASXL1、EZH2基因突變發(fā)生率在CR/PR組、SD組

9、及治療失敗組均無(wú)明顯差異。而CR/PR組TET2突變率66.7%(2/3)，SD組TET2突變率25.0%(2/8)，治療失敗組無(wú)TET2突變患者(0); TET2突變患者中達(dá)CR/PR者2例（有效率50%），TET2野生型患者中達(dá)CR/PR者1例（有效率5.9%），TET2突變和地西他濱療效間的關(guān)系有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.029)，TET2突變患者使用地西他濱治療療效更好。
　　 結(jié)論：
　　 1．MDS患者存在表觀遺傳

10、調(diào)節(jié)子基因TET2、ASXL1、EZH2突變，按2008年WHO分型，各亞型突變率無(wú)明顯差異。
　　 2．TET2基因突變影響MDS患者總體生存，是預(yù)后良好因素；使用去甲基化藥物地西他濱治療患者中，攜有TET2突變者療效較好，檢測(cè)TET2基因突變可指導(dǎo)治療選擇。
　　 3．ASXL1基因突變可使MDS患者髓系細(xì)胞獲得增殖優(yōu)勢(shì)，和MDS患者總體生存及疾病進(jìn)展無(wú)明顯相關(guān)性
　　 4．EZH2基因突變?cè)贗PSS較高危組