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1、指導(dǎo)小組成員名單盧大儒教授朱化星博士陳帥博士摘要甲醛脫氫酶(FDH)作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一廣泛存在于原核和真核生物中。該酶能利用NAD作為輔酶，將有毒的甲醛氧化。目前發(fā)現(xiàn)除了惡臭假單胞菌甲醛脫氫酶外，其余的甲醛脫氫酶均需要谷胱甘肽參與甲醛的氧化過程。為了能對(duì)其他物種谷胱甘肽非依賴性甲醛脫氫酶進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能研究，需要建立大腸桿菌表達(dá)體系實(shí)現(xiàn)具有生物酶活性的甲醛脫氫酶的可溶性表達(dá)和高度純化。銅綠假單胞菌(即綠膿桿菌，
2、Pseudomonasaeruginosa)是一種革蘭氏陰性致病菌，可引起人體感染。該菌的FDH與惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)FDH具有高度序列相似性。本研究通過分子克隆技術(shù)構(gòu)建銅綠假單胞菌甲醛脫氫酶基因表達(dá)載體，利用共表達(dá)技術(shù)，通過分子伴侶‰ES、GroEL和Tig與甲醛脫氫酶在大腸桿菌中共表達(dá)，減少了重組蛋白包涵體的形成，顯著提高了可溶性銅綠假單胞菌FDH在大腸桿菌中的表達(dá)水平。通過三步色譜柱分離純化方法，可從
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