耐大環(huán)內(nèi)酯類藥物雞毒支原體的誘導(dǎo)和耐藥基因的突變分析.pdf_第1頁(yè)
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1、在含有遞增濃度紅霉素或替米考星的液體培養(yǎng)基中連續(xù)傳代培養(yǎng)雞毒支原體S6和BG44T藥物敏感菌株,使其逐漸產(chǎn)生耐藥性,然后篩選出高度耐藥菌株.紅霉素對(duì)篩選出的S6耐紅霉素株和BG44T耐紅霉素株的MIC≥436.7μg/ml,替米考星對(duì)篩選出的S6耐替米考星和BG44T耐替米考星的MIC≥400μg/ml.耐紅霉素的S6和BG44T菌株同時(shí)對(duì)替米考星、泰樂菌素、林可霉素有交叉耐藥性.耐替米考星的S6和BG44T菌株對(duì)紅霉素、泰樂菌素、林可

2、霉素有交叉耐藥性.23SrRNAV區(qū)域基因突變與細(xì)菌產(chǎn)生大環(huán)內(nèi)酯類耐藥性有關(guān).為了檢測(cè)雞毒支原體的23SrRNAV區(qū)域基因是否發(fā)生耐藥突變,首先把雞毒支原體上處于兩個(gè)不同位置的23SrRNAV區(qū)域基因(論文中分別將這兩處基因稱為23rrn1和23rrn2)區(qū)分開來.對(duì)雞毒支原體酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,將凝膠上的DNA轉(zhuǎn)移到尼龍膜上,進(jìn)行雜交,確定了含有23SrRNAV區(qū)域基因的限制片段的位置.將這些限制片段分離出來,進(jìn)行PCR擴(kuò)增和

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