水環(huán)境耐藥細菌中qnr基因、ISCR1元件和新型dfr基因的研究.pdf

1、隨著醫(yī)療水平的不斷提升與進步，種類繁多的抗生素日益被開發(fā)出來并投放到市場之中，但是抗生素的大量使用以及濫用，造成環(huán)境中抗生素的大量殘留，使細菌的耐藥率不斷攀升，“超級細菌”的出現(xiàn)給我們敲響了警鐘，現(xiàn)在新藥物的研發(fā)速度遠遠趕不上細菌耐藥性產(chǎn)生及傳播速度，細菌耐藥性尤其是多重耐藥性已經(jīng)對人類的健康構成了嚴重的威脅，成為了全球性問題，同時也成為了全球關注和研究的熱點內容。
　　 喹諾酮類抗菌藥物從早期主要用于治療尿道感染發(fā)展到治療腸道

2、感染和呼吸道感染，目前已在臨床、畜牧業(yè)和水產(chǎn)業(yè)中廣泛使用，細菌對其耐藥性也逐漸呈蔓延趨勢，耐藥機制日趨復雜。喹諾酮類耐藥機制主要分為染色體介導的耐藥和質粒介導的耐藥，后者對細菌耐藥性的廣泛傳播起著重要作用。1998年首次報道了質粒介導的喹諾酮類耐藥機制，即質粒上qnr基因介導的細菌對氟喹諾酮耐藥機制，qnr基因可在不同細菌中迅速水平傳播，引發(fā)的感染不易控制，使得院內感染大范圍的流行。以往的研究表明，qnrA，qnrB通常位于含ISCR1

3、元件的復雜Ⅰ型整合子下游，qnrS則尚未發(fā)現(xiàn)存在于整合子上，ISCR元件作為一種新的基因捕獲系統(tǒng)，它可以移動鄰近的任何DNA序列，為耐藥基因在不同菌屬間的水平傳播提供了高效媒介。因此qnr基因常與氨基糖苷類、甲氧芐啶及氯霉素等多數(shù)位于ISCR1元件上游Ⅰ型整合子中的耐藥基因盒相關，此外，qnr基因通常與β-內酰胺類耐藥基因相關。qnr基因存在于復雜整合子中并與其他多種耐藥基因的共同整合，縮小了臨床醫(yī)生治療相關細菌感染時選藥或聯(lián)合用藥的空

4、間，給我們帶來了嚴峻的挑戰(zhàn)。
　　 本課題主要研究濟南地區(qū)水環(huán)境中細菌耐藥性情況，以及耐藥基因qnr的分布，評估抗生素污染對對生態(tài)環(huán)境造成的影響，發(fā)現(xiàn)環(huán)境中新的耐藥機制，研究細菌基因移動元件ISCR1，發(fā)現(xiàn)基因水平轉移的一些新規(guī)律，并對發(fā)現(xiàn)的新型耐藥基因進行克隆表達和蛋白純化以及后續(xù)分析。希望我們的研究結果能對控制日益嚴重的抗生素耐藥性及其傳播提供參考，對治療相關細菌感染時的選藥或聯(lián)合用藥提供一定的理論依據(jù)，以及對藥物研發(fā)提供新

5、靶點。
　　 本實驗在從濟南地區(qū)醫(yī)院廢水環(huán)境和生活廢水環(huán)境水樣中分離篩選出來的391株耐藥革蘭氏陰性菌中，篩選到31株含有qnr基因的菌株和41株含有ISCR1元件的菌株，并進一步對其進行菌屬歸類和抗菌藥物敏感性分析，發(fā)現(xiàn)它們主要分布在10個菌屬中，對qnr基因進行分型共發(fā)現(xiàn)了qnrA1、qnrB2，qnrB4，qnrB6，qnrB9，qnrS1六種常規(guī)變體以及qnrB26一種新變體，另外兩種質粒介導的喹諾酮耐藥基因aac(6'