香石竹抗衰老遺傳轉(zhuǎn)化主要影響因素的研究.pdf

1、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文香石竹抗衰老遺傳轉(zhuǎn)化主要影響因素的研究姓名：葛欣申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：植物生理學(xué)指導(dǎo)教師：吳絳云2000.5.1S t u d i e so n t h eI n f l u e n c i n g F a c t o r o f A n t i s e n e s c e n c eG e n e t i cT r a n s f o r m a t i o n S y s t e m o f C a r n

2、 a t i o nA b s t r a c tT h e c a l l u sa n dh y p o c o t y lw e r et r a n s f o r m e db yu s i n gA g r o b a c t e r i u mT u m e f a c i e n sa n dm i c r o p j e c t i l e b o m b a r d m e n t , S t u d y o n e

3、 v e r y i n f l u e n c i n g f a c t o r ．T h e s t a b l e a n d h i 蜚p e r f o r m a n c e s y s t e mw a s e s t a b l i s h e d ，t h er e s u l tw a s p o s i t i v eb y G u s ( g - O l u r c u r o n i d a s e ) e

4、n z y m ea e t i v i t yt e s ta n d P C R ( P o l y m e r a s e C h i n R e a c t i o n ) t e s t ，w h i c h t h e f o r e i g ng e n e E F E ( E t h y l e n eF o r m a t i o n E n z y m 曲h a d b e e n i n t e g r a t e

5、 da n d e x p r e s s e d i nc a r n a t i o n w a s v e r i f i c a t i o n ．T h i sr e s e a r c h r e s u l ti n d i c a t e d ：1 ．T h eh a s a lm e d i u ms u i t a b l e f o rc a r n a t i o ni s M S Z + 2 ．4 一D0 ．1

6、 m g ／L + B A0 ．2 m e ／L ；M S Z + B A 0 ．5m g ／L + N A A 0 ．2m g 幾：1 ／2 M S + I B A l ．0 m g ／L + G A 3 O ．I m g ／L + A C 0 ．8m g 九。2 ．I nt h em e t h o do f c o - e u R i v a t i o n 。t h eb e s ti nf e e f i o nc o n c

7、 e n t r a t i o no f A g r o b a c t e r i u mT u m e f a c i e n s { s1 0 X ，a n d t h e b e s tc o - c u l t i v a t i o n t i m ei s3d a y s 。a n d t h e b e s tm a t e r i a li sc a l l u s ．3 ，T h eb e s tp a r a m

8、 e t e 性o f t r a n s g e n e s i sb ym i c m p r o j e c t i l eb o m b a r d m e n t i s m i c r o ! ) r o j e c t i l eb o m b a n d m e n o t v e l o c i t y i s l1 0 0 p s i ．S a m p l e h e i g h t i s6 c e n t i m

9、 e t e r s4 ．T h er e c e p t o r s b y t h et w o d i f f e r e n tm e t h o d s a l lp o s s e s s t h er e s i s t a n to f K m 。W h i e h g r e ww e l l o n m e d i u m , a n d C a l ld i f f e r e m i 嬲o n t h ep l

10、a n t l e t s 。a n d r e p r o d u c t e d t h e p l a n t ．5 ．T h ef o r e i g ng e n e ( E F E ) w a st r a n s f e r r e d i n t o c a r n a t i o nv a r i e t i e s c a l l u sa n dh y p o c o t y ls u c c e s s f u

11、l l yu n d e rt h ea b o v em e n t i o n e dm o d e r a t ec o n d i t i o n s ．1 麓er e s u l ti s p o s i t i v eb yG u se n z y m ea c t i v i t y t e s t a n dP C R t e s t ，硝潞t h ef o 喇辨g e n e ( E F E ) h a db e e

12、ni n t e g r a t e da n de x p r e s s e d i n c a r n a t i o n ，P o s t g r a d u a t e ：O e X i nS u p e r v i s o r s ：P r o f ．W u J a n g W u nk e y w o r d s ：C a r n a t i o n A g r o b a c t e r ／u m m i c m p m