牛皰疹病毒5型編碼的miR-10對其靶基因Us3的調(diào)控作用.pdf

1、分類號 密級華中農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文牛皰疹病毒5 型編碼的m i R - l O 對其靶基因U s 3 的調(diào)控作用T h e r e g u l a t i o no f B o v i n e h e r p e s v i r u s 5e n c o d e dm i R - l O o n i t st a r g e t g e n eU s 3研究生：周清學 號：2 0 1 1 3 0 2 1 1 0 1 8 5指導教師：劉

2、正飛教授指導小組：陳煥春院士傅振芳教授何啟蓋教授趙凌教授宋云峰副教授專業(yè)：預防獸醫(yī)獲得學位名稱：農(nóng)學碩士研究方向：動物傳染病獲得學位時間：2 0 1 4 年6 月華中農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院二。一四年六月牛皰疹病毒5 型編碼的m i R o l 0 對其靶基因U s 3 的調(diào)控作用目 錄摘 要???????????????????????????????????????????．iA b s t r a c t ??????????．????

3、????????????????????????．???．．i i i縮略語表( A b b r e v i a t i o n ) ????????????????????????v第1 章文獻綜述???????????????????????????．1引言???????????????????????????????一l1 ．1 B o H V 5 流行病學及其致病性????????????????????11 ．2B o H V

4、 - 5 的分子生物學特征????????????????????一21 ．3m i R N A 的生物合成及作用機制???????????????????41 ．4 病毒的m i R N A ??????????????????????????51 ．4 ．1 皰疹病毒與m i R N A ?????????????????????．61 ．5B o H V - 1 和B o H V - 5 編碼的m i R N A ????????

5、?????????．61 ．6 本研究的目的和意義???????????????????????8第2 章材料與方法???????????????????????????．92 ．1 實驗材料????????????????????????????92 ．1 ．1 病毒、菌種、質(zhì)粒與細胞??????????????????一92 ．1 ．2 實驗儀器及耗材??????????????????????一92 ．1 ．3 酶及主要事試劑??

6、????????????????????一92 ．1 ．4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制??????????????????1 02 ．1 ．5 本研究中所用的寡核苷酸??????????????????1 22 ．1 ．6 實驗動物?????????????????????????l 32 ．2 試驗方法???????????????????????????．1 32 ．2 ．1 雙熒光素酶報告質(zhì)粒的構(gòu)建?????????????????1

7、 32 ．2 ．2 雙熒光報告系統(tǒng)檢測????????????????????1 72 ．2 ．3R e a l —t i m e 檢測在R N A 水平的調(diào)節(jié)??????????????l 82 ．2 ．4U s 3 多抗的制備??????????????????????．1 92 ．2 ．5 對U s 3 蛋白表達情況的檢測?????????????????2 12 ．2 ．6 一步法生長曲線的測定?????????????????

8、??2 l2 ．2 ．6 凋亡蛋白的檢測??????????????????????2 22 ．2 ．6 流式細胞實驗???????????????????????2 22 ．2 ．7 統(tǒng)計學方法????????????????????????2 2第3 章結(jié)果和分析??????????????????????????2 33 ．1 B o H V - 5 m i R - 1 0 靶基因的預測???????????????????2 3