葡萄酚類(lèi)物質(zhì)及其生物合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因表達(dá).pdf

1、本文以‘左山一’、‘左山二’、‘雙紅’、‘雙優(yōu)’、‘雙豐’5個(gè)山葡萄品種和2個(gè)山-歐雜種葡萄品種‘左紅一’、‘左優(yōu)紅’果皮和酒為試驗(yàn)材料,應(yīng)用HPLC-MS/MS技術(shù),對(duì)果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮及酒中花色苷和非花色苷酚種類(lèi)及含量變化規(guī)律進(jìn)行了研究。同時(shí),以‘雙紅’山葡萄果實(shí)為試材,應(yīng)用HPLC-MS/MS和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)果實(shí)發(fā)育過(guò)程中酚類(lèi)物質(zhì)的含量變化及生物合成相關(guān)的14個(gè)結(jié)構(gòu)基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行了定量分析。
　　 研究

2、結(jié)果表明,不同品種果皮中花色苷組成不同,在7個(gè)品種果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮中共檢測(cè)到花色苷15種。其中,雙糖苷6種,單糖苷9種,單糖苷中檢測(cè)出乙?；咸烟擒?種,香豆?；咸烟擒?種。7個(gè)品種轉(zhuǎn)色前均未檢測(cè)到花色苷,隨著果實(shí)發(fā)育,花色苷含量不斷增加,到達(dá)成熟時(shí)含量最高。主成分分析表明,花青素類(lèi)、二甲花翠素類(lèi)和甲基花青素類(lèi)花色苷對(duì)果皮中花色苷的組成起決定作用。7個(gè)品種酒中共檢測(cè)到花色苷15種。其中,雙糖苷6種,單糖苷9種,在果皮及酒中首次檢測(cè)到

3、花葵素一3,5-雙葡萄糖苷,在酒中未檢測(cè)出乙?；拖愣辊；ㄉ?。主成分分析表明,花青素類(lèi)、甲基花翠素類(lèi)和花翠素類(lèi)花色苷對(duì)酒中花色苷組成起決定作用。
　　 7個(gè)品種果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮中共檢測(cè)到18種非花色苷酚。其中,苯甲酸類(lèi)3種,肉桂酸類(lèi)4種,黃烷-3-醇類(lèi)3種,黃酮醇類(lèi)5種,白藜蘆醇類(lèi)3種。果皮中非花色苷酚的變化為轉(zhuǎn)色前含量呈上升趨勢(shì),轉(zhuǎn)色期至100％著色呈下降趨勢(shì),而后緩慢上升至成熟。主成分分析表明,肉桂酸類(lèi)、白藜蘆醇類(lèi)和黃

4、酮醇類(lèi)對(duì)果實(shí)發(fā)育過(guò)程中果皮中非花色苷酚的組成起決定作用。在7個(gè)品種酒中,共檢測(cè)到30種非花色苷酚。其中,苯甲酸類(lèi)5種,肉桂酸類(lèi)7種,黃烷-3-醇類(lèi)5種,黃酮醇類(lèi)9種,白藜蘆醇類(lèi)4種。主成分分析表明,肉桂酸類(lèi)、黃烷-3-醇類(lèi)和苯甲酸類(lèi)對(duì)酒中非花色苷酚組成起決定作用。
　　 ‘雙紅’山葡萄果實(shí)的生長(zhǎng)曲線(xiàn)表現(xiàn)為雙“S”型。轉(zhuǎn)色前未檢測(cè)到花色苷,轉(zhuǎn)色后花色苷不斷積累,至成熟含量最高,花翠素類(lèi)、甲氧基類(lèi)、單糖苷類(lèi)花色苷與總花色苷的變化規(guī)律

5、相一致。苯甲酸類(lèi)花后2-6周未檢測(cè)到,花后8周至100％著色含量呈上升趨勢(shì),而后下降至成熟。肉桂酸類(lèi)、黃烷-3-醇類(lèi)在果實(shí)整個(gè)發(fā)育過(guò)程中含量呈下降趨勢(shì)。轉(zhuǎn)色前未檢測(cè)到白藜蘆醇類(lèi)物質(zhì),轉(zhuǎn)色期至成熟含量呈上升趨勢(shì)。
　　 ‘雙紅’果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,酚類(lèi)物質(zhì)生物合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)因果實(shí)發(fā)育時(shí)期而不同。PAL、CHI1、F3H2、DFR、LDOX花后2-4周為上調(diào)表達(dá),花后6周至轉(zhuǎn)色期為下調(diào)表達(dá),轉(zhuǎn)色期至成熟為上調(diào)表達(dá),轉(zhuǎn)色期至成熟花

6、色苷的含量變化與這5個(gè)酶基因的轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān);CHS3、RS、UFGT、GST、OMT花后2周至轉(zhuǎn)色期為下調(diào)表達(dá),轉(zhuǎn)色期至成熟為上調(diào)表達(dá),轉(zhuǎn)色期至成熟花色苷的含量變化與CHS3、UFGT、GST的轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān),白藜蘆醇類(lèi)的含量變化與RS的轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān),甲氧基類(lèi)花色苷的含量變化與OMT的轉(zhuǎn)錄水平呈正相關(guān);F3'H花后2-4周為上調(diào)表達(dá),花后6周為下調(diào)表達(dá),花后8周至成熟為上調(diào)表達(dá),轉(zhuǎn)色期至成熟花青素類(lèi)花色苷的含量變化與F3'H的