版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、禽呼腸孤病毒(ARV)是家禽重要疾病之一,主要感染雞和火雞,常與其他疾病混合感染,并引起免疫抑制。雖然ARV感染已被證實(shí)可誘導(dǎo)宿主細(xì)胞凋亡,但ARV與其靶細(xì)胞之間的相互作用關(guān)系,需進(jìn)一步研究。
為了探討ARV分離株GX/2010/1感染細(xì)胞后對(duì)自噬的影響,我們首先用表達(dá)GFP-LC3融合蛋白的重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero)和雞胚成纖維細(xì)胞(CEF),然后再感染ARV分離株GX/2010/1,利用熒光顯微鏡觀察G
2、FP-LC3在細(xì)胞內(nèi)形成的聚點(diǎn)。結(jié)果顯示,ARV感染組和雷帕霉素處理組發(fā)生聚點(diǎn)的細(xì)胞顯著多于對(duì)照組。進(jìn)一步采用透射電子顯微鏡對(duì)ARV感染的Vero細(xì)胞中形成的自噬泡進(jìn)行觀察。結(jié)果顯示,經(jīng)ARV感染的Vero細(xì)胞中可觀察到許多典型自噬結(jié)構(gòu),比如杯狀體、腫脹的線粒體、自噬體雙層膜結(jié)構(gòu)等。
因?yàn)長(zhǎng)C3Ⅱ表達(dá)量通常作為自噬發(fā)生水平的標(biāo)志,我們通過(guò)免疫印跡的方法檢測(cè)ARV分離株GX/2010/1感染Vero細(xì)胞和CEF細(xì)胞中LC3-
3、Ⅱ/β-Actin比值的變化,發(fā)現(xiàn)ARV感染組和雷帕霉素處理組LC3-Ⅱ/β-Actin比值均顯著升高,并在病毒感染早期促進(jìn)自噬,在病毒感染晚期則抑制自噬。進(jìn)一步檢測(cè)p-mTOR/β-Actin和p-Akt/β-Actin的比值,結(jié)果表明(Ⅰ)型PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路依賴于自噬發(fā)生。
為了探討宿主細(xì)胞自噬對(duì)ARV分離株GX/2010/1復(fù)制的影響,我們對(duì)藥物誘導(dǎo)和抑制Vero細(xì)胞和CEF細(xì)胞自噬的條件進(jìn)行優(yōu)化,
4、結(jié)果顯示100nM雷帕霉素和50μM的氯喹可分別顯著誘導(dǎo)和抑制宿主細(xì)胞自噬。采用以上濃度預(yù)處理Vero和CEF細(xì)胞,然后感染病毒,TCID50法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液上清中子代病毒的滴度,發(fā)現(xiàn)自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素可提高ARV分離株GX/2010/1感染宿主細(xì)胞的病毒復(fù)制水平,而自噬抑制劑氯喹則通過(guò)抑制自噬溶酶體的形成,致使病毒滴度降低。表明細(xì)胞自噬對(duì)ARV復(fù)制具有促進(jìn)作用。
總之,本研究證實(shí)了自噬決定ARV分離株GX/2010/1感
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 禽呼腸孤病毒誘導(dǎo)SPF雞的細(xì)胞自噬及其與病毒復(fù)制的關(guān)系.pdf
- 禽呼腸孤病毒p17蛋白在細(xì)胞中的定位與其誘導(dǎo)的自噬以及病毒復(fù)制相關(guān).pdf
- 自噬抑制劑減少禽呼腸孤病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞及雞胚組織凋亡.pdf
- RNA干擾抑制草魚呼腸孤病毒復(fù)制的細(xì)胞模型.pdf
- 禽呼腸孤病毒形態(tài)的早期步驟【文獻(xiàn)綜述】
- RSV誘導(dǎo)Hep2細(xì)胞自噬在病毒復(fù)制中的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 地塞米松誘導(dǎo)細(xì)胞自噬增強(qiáng)HBV病毒的復(fù)制和產(chǎn)生.pdf
- 禽呼腸孤病毒M組基因的克隆與序列分析.pdf
- 禽呼腸孤病毒σC、σB基因的克隆及表達(dá).pdf
- 自噬現(xiàn)象與乙肝病毒復(fù)制的關(guān)系.pdf
- 禽呼腸孤病毒L2基因的克隆與序列分析.pdf
- 乙型腦炎病毒復(fù)制與細(xì)胞自噬的相互作用.pdf
- 中國(guó)禽呼腸孤病毒番鴨分離株的純化及其核酸與結(jié)構(gòu)蛋白分析.pdf
- RNA基因干擾技術(shù)抑制草魚呼腸孤病毒復(fù)制的研究.pdf
- 表達(dá)禽呼腸孤病毒σB、σC蛋白的重組馬立克氏病毒的構(gòu)建.pdf
- 腸道病毒71型病毒蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的研究.pdf
- 鴨源呼腸孤病毒的分離與鑒定.pdf
- 禽呼腸孤病毒流行株的進(jìn)化及致病性研究.pdf
- 藍(lán)舌病病毒感染誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的作用和機(jī)制.pdf
- 禽呼腸孤病毒σC基因的克隆表達(dá)及其免疫原性初步研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論