大豆疫霉和棉花黃萎菌幾個效應(yīng)因子的分泌和轉(zhuǎn)錄激活活性的驗(yàn)證與靶標(biāo)蛋白鑒定.pdf

1、大豆疫霉菌（Phytophthorasojae）是卵菌的重要模式種，引起的大豆疫霉根腐病是世界上廣泛分布的毀滅性病害。研究大豆疫霉與植物的互作機(jī)制，對于防治植物卵茵病害意義重大。棉花黃萎病由大麗輪枝菌（Verticilliumdahliae）引起，是棉花生產(chǎn)上危害最為嚴(yán)重的世界性病害之一，在世界各主要產(chǎn)棉區(qū)均有發(fā)生，極大地限制著棉花產(chǎn)量和質(zhì)量的提高，也是困擾我國棉花生產(chǎn)的重大難題。
　　卵菌和真菌植物病原物分泌的效應(yīng)因子會被轉(zhuǎn)運(yùn)到

2、植物細(xì)胞中在病害擴(kuò)展和植物抗病反應(yīng)中起作用。大豆疫霉菌的PsISO基因和大麗輪枝菌的VdISO基因都可以編碼異分支酸水解酶蛋白。PsCRN108和PsCRN78是大豆疫霉的CRN家族效應(yīng)因子。這四個蛋白是否分泌還尚不清楚，本文應(yīng)用酵母分泌系統(tǒng)對PsISO，VdISO，PsCRN108和PsCRN78四個基因的分泌功能進(jìn)行了檢測，結(jié)果證明它們在酵母中具有分泌功能，說明它們在病原物侵染植物中也具有分泌能力，為進(jìn)一步研究這幾個效應(yīng)蛋白在致病過

3、程中發(fā)揮作用奠定了基礎(chǔ)。
　　轉(zhuǎn)錄因子是在基因表達(dá)過程中對基因的轉(zhuǎn)錄起激活或抑制的作用的反式作用因子。本實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用生物信息學(xué)的方法研究大豆疫霉的效應(yīng)因子的功能，發(fā)現(xiàn)Avh138，Avh256，Avh454，Avh62，CRN108幾個效應(yīng)因子可能具有轉(zhuǎn)錄激活活性，實(shí)驗(yàn)通過酵母細(xì)胞測試幾個的效應(yīng)因子的轉(zhuǎn)錄激活活性，但在酵母中沒有檢測到幾個基因的轉(zhuǎn)錄激活活性。
　　本實(shí)驗(yàn)采用酵母雙雜交技術(shù)，以大豆疫霉P6497菌株中的CRN11