金魚(yú)Striatin基因?qū)痿~(yú)胚胎發(fā)育的調(diào)控功能分析.pdf

1、蛋白磷酸酶-2A(PP2A),是真核生物體內(nèi)最主要的一種蛋白磷酸酶,它是一個(gè)異源三聚體,包括支架蛋白A亞基、催化C亞基以及調(diào)節(jié)亞基B。目前的研究表明調(diào)節(jié)亞基B,由超過(guò)16個(gè)不同基因編碼,因此,除了有調(diào)節(jié)PP2A活性的功能之外,很可能還有其它的功能。
　　 為了研究PP2A調(diào)節(jié)亞基在脊椎動(dòng)物發(fā)育過(guò)程中充當(dāng)怎樣的角色,我們克隆了金魚(yú)PR110/B'"家族調(diào)節(jié)亞基striatin以及SG2NA,并且我們?cè)诮痿~(yú)的組織及胚胎中分析了這兩個(gè)

2、基因的組織特異性及發(fā)育表達(dá)模式。我們的結(jié)果顯示striatin基因全長(zhǎng)cDNA包含2349個(gè)核苷酸,推測(cè)其編碼782個(gè)氨基酸；SG2NAα基因包含一個(gè)2118 bp的開(kāi)放閱讀框,推測(cè)其編碼705個(gè)氨基酸,其另外的一個(gè)變體SG2NAβ包含一個(gè)2148 bp的開(kāi)放閱讀框,推測(cè)其編碼715個(gè)氨基酸。PR110/B'"的這兩個(gè)異構(gòu)體與其它物種之間顯示出很高的同源性。
　　 Striatin基因的功能,除了作為PP2A的調(diào)節(jié)亞基之外,其它

3、的功能目前還不是很清楚。本研究為了進(jìn)一步研究Striatin基因在低等脊椎動(dòng)物中的功能,首先,我們從金魚(yú)的腦中提取了RNA,并通過(guò)反轉(zhuǎn)錄得到了striatin cDNAs,再通過(guò)RT-PCR我們克隆了長(zhǎng)約1000bp左右?guī)盖形稽c(diǎn)的基因片段。其次,使用反義RNA技術(shù),前面得到的基因片段可以被反向的插入到pEGFP-C3載體(一種綠色熒光蛋白載體)中構(gòu)成反義載體pEGFP-striatin-AS。最后,在金魚(yú)胚胎1cell時(shí)期,將反義載體