模擬鴨小腸液制備方法的研究.pdf

1、本研究的目的是通過(guò)對(duì)北京鴨小腸消化的生理環(huán)境的體外模擬，研發(fā)出一套適用的鴨小腸主要消化酶的酶譜以及用于消化的緩沖液試劑，并驗(yàn)證用該消化酶配制的消化液在單胃動(dòng)物仿生消化儀上的消化效果，最終得到一種模擬鴨小腸液制備的方法。這既可為鴨飼料在單胃動(dòng)物仿生消化儀上進(jìn)行體外快速模擬消化試驗(yàn)提供依據(jù)，同時(shí)也有可為體外模擬鴨飼料全消化道的消化及仿生法評(píng)定鴨飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值解決酶的來(lái)源問(wèn)題。
　　 本論文第一部分旨在通過(guò)研究鴨腸道套管手術(shù)對(duì)日糧干物質(zhì)

2、消化率和代謝能的影響，探討瘺術(shù)鴨能否作為大量收集鴨腸液的代表性動(dòng)物提供決策依據(jù)。試驗(yàn)采用系統(tǒng)分組設(shè)計(jì)，主因素為2水平(瘺術(shù)，非瘺術(shù))，二級(jí)處理因素為瘺術(shù)處理內(nèi)重復(fù)組(其中瘺術(shù)鴨2組，非瘺術(shù)鴨2組)。分別測(cè)定在2水平主因素和二級(jí)處理因素下，試驗(yàn)鴨代謝體重?fù)p失、內(nèi)源性排泄量、干物質(zhì)消化率與日糧代謝能值。結(jié)果表明，在體重?fù)p失上，瘺術(shù)使實(shí)驗(yàn)鴨的代謝體重?fù)p失有顯著地升高(P<0.05)；在內(nèi)源排泄量上，瘺術(shù)對(duì)鴨內(nèi)源糞的排泄量、糞樣能值含量和內(nèi)源能

3、排泄量上都沒(méi)有顯著差異(P>0.05)；在日糧干物質(zhì)消化率與代謝能值上，瘺術(shù)對(duì)鴨日糧的干物質(zhì)消化率及代謝能沒(méi)有顯著影響(P>0.05)，對(duì)日糧的能量代謝也沒(méi)有顯著差異(P>0.05)。這表明，瘺術(shù)對(duì)鴨腸道的基礎(chǔ)代謝及兩種日糧的消化代謝都沒(méi)有明顯影響。
　　 第二部分旨在研究北京鴨空腸液中淀粉酶，脂肪酶，胰蛋白酶和糜蛋白酶的總消化能力占體內(nèi)腸液所有酶總消化能力的比例，及其他未知酶發(fā)生變化后對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，

4、根據(jù)腸液酶組成設(shè)3個(gè)處理，處理間4種主要酶的活性一致。處理1為鴨內(nèi)源腸液(4種酶+其他酶)，處理2為鴨腸液干粉劑+試劑酶(4種酶+其他酶)，處理3為試劑酶(4種酶)。每個(gè)處理設(shè)置5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1根消化管。分別測(cè)定4種飼料原料(玉米、豆粕、棉粕、小麥麩)和4種飼糧的干物質(zhì)和能量消化率。結(jié)果表明：1)不同處理對(duì)飼料原料與飼糧干物質(zhì)、能量消化率有顯著影響(P<0.05)，影響程度因試驗(yàn)材料不同而有所差異；2)處理2對(duì)飼料原料和飼糧的干物質(zhì)

5、和能量消化率分別為處理1的100.09％～101.76％和100.82％～103.52％；3)處理3對(duì)飼料原料和飼糧的干物質(zhì)和能量消化率分別為處理1的89.38％～110.85％和86.39％～115.63％。結(jié)果提示：在鴨空腸液中，淀粉酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶和脂肪酶4種主要酶的總消化能力占內(nèi)源腸所有酶總消化能力的比例>86.39％；其他未知酶發(fā)生改變后對(duì)測(cè)試結(jié)果的干擾<1.72％。以鴨小腸液純化酶粉劑為主體，采用試劑酶調(diào)節(jié)4種主要消化

6、酶活性與體內(nèi)腸液消化酶活性等同制備鴨模擬小腸液，是比較理想的制備方法。
　　 第三部分旨在通過(guò)比較研究鴨內(nèi)源腸液與模擬腸液對(duì)飼料水解動(dòng)力學(xué)的差異，從而確定鴨內(nèi)源腸液與模擬腸液是否具有相同的酶學(xué)特性，為鴨模擬腸液的制備方法進(jìn)一步提供決策依據(jù)。本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，兩種腸液分別為內(nèi)源腸液和以鴨腸液干粉劑(第一部分提供的腸液)為主+試劑酶配制的模擬腸液，設(shè)置7個(gè)時(shí)間梯度，分別為3、6、9、12、15、18和21h，分別測(cè)定玉米

7、、大豆粕的仿生干物質(zhì)消化率、仿生能量消化率，每個(gè)樣品5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)一個(gè)消化管。結(jié)果表明，鴨內(nèi)源腸液與模擬腸液對(duì)玉米水解動(dòng)力學(xué)比較研究中，3h的玉米仿生干物質(zhì)消化率差異不顯著(P>0.05)，6、9、12、15、18和21h玉米仿生干物質(zhì)消化率差異顯著(P<0.05)，6和12h的仿生玉米能量消化率差異不顯著(P>0.05)，3、9、15、18和21h的仿生玉米能量消化率差異顯著(P<0.05)，模擬腸液對(duì)仿生玉米的干物質(zhì)和能量消化率

8、占內(nèi)源腸液相應(yīng)值的97.31％-99.78％；鴨內(nèi)源腸液與模擬腸液對(duì)豆粕水解動(dòng)力學(xué)比較研究中，3、15、18和21h的豆粕仿生干物質(zhì)消化率差異不顯著，6、9和12h的仿生豆粕干物質(zhì)消化率差異顯著，3、18和21h的仿生豆粕能量消化率差異不顯著，6、9、12和15h的仿生豆粕能量消化率差異顯著。模擬腸液對(duì)豆粕的仿生干物質(zhì)和能量消化率占內(nèi)源腸液相應(yīng)值的95.19～99.77％。這表明，內(nèi)源腸液和模擬腸液對(duì)玉米和豆粕的仿生干物質(zhì)和能量消化率的