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1、本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象為斜帶石斑魚,分兩種規(guī)格(第一階段7.40g±0.03,幼魚;第二階段81.50g±0.05,中魚)進(jìn)行試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)在廣東海洋大學(xué)東海島生物基地室內(nèi)海水養(yǎng)殖系統(tǒng)的鋼化玻璃桶內(nèi)進(jìn)行,養(yǎng)殖水溫28.5-31.5℃,pH7.5-8.0,鹽度26-30。旨在研究飼料維生素A(VitaminA,VA)、維生素D(Vitamin D,VD)水平對(duì)兩種規(guī)格斜帶石斑魚生長(zhǎng)、飼料利用、免疫酶活性、肝臟脂肪代謝酶活性及其mRNA表達(dá)量的影響。
2、結(jié)果如下:
1.本研究采用白魚粉、明膠和酪蛋白(去維生素)為主要蛋白源,魚油、玉米油和磷脂油為主要脂肪源,配制VA添加水平分別為0,1000,2000,4000,8000和20000IU/kg的6組實(shí)驗(yàn)飼料。養(yǎng)殖周期均為10W。結(jié)果表明:對(duì)于生長(zhǎng)和飼料利用的結(jié)果分析可見,飼料VD添加水平增加,兩種規(guī)格實(shí)驗(yàn)魚的增重率(WGR)和特定生長(zhǎng)率(SGR)均呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)(P<0.05)。幼魚階段,在2000IU組WGR最高,顯著高
3、于對(duì)照組和20000IU組(P<0.05);中魚階段,WGR在1000IU組最高,與2000IU組差異不顯著(P>0.05),但顯著高于其余各組(P<0.05),且對(duì)肥滿度(FC)影響顯著(P<0.05),1000IU組FC最高,總體呈現(xiàn)先升后降趨勢(shì)(P<0.05);成活率的變化,幼魚階段,當(dāng)VA添加水平為20000IU/kg時(shí),其成活率顯著降低(P<0.05),但HIS變化不顯著(P>0.05);中魚階段,成活率和HIS均不受VA水平
4、的影響(P>0.05);對(duì)體成分分析結(jié)果為,VA水平對(duì)兩種規(guī)格的全魚水分、粗蛋白(CP)、粗脂肪(CF)和粗灰分(CA)含量無顯著影響(P>0.05),但在中魚實(shí)驗(yàn)中,隨VA水平的增加肝脂肪沉積量呈先升后降,后趨于穩(wěn)定(P<0.05);對(duì)免疫指標(biāo)結(jié)果分析可見,兩階段實(shí)驗(yàn)中,VA水平顯著提高血清和肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),但對(duì)血清堿性磷酸酶(AKP)活性影響不顯著(P>0.05);在中魚實(shí)驗(yàn)中,VA顯著降低血清丙二
5、醛(MDA)含量(P<0.05),顯著提高血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性(P<0.05);血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果為,在兩種規(guī)格魚的實(shí)驗(yàn)中,血清膽固醇(CHOL)顯著降低(P<0.05),而甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量隨VA水平增加呈先升后降趨勢(shì)(P<0.05),在1000IU組時(shí),兩實(shí)驗(yàn)階段的TG含量最高,并且在中魚實(shí)驗(yàn)中,LDL-C含量最高;肝臟酶活性指標(biāo)測(cè)定結(jié)果為,在兩階段實(shí)驗(yàn)中,VA水平
6、顯著影響石斑魚肝臟脂肪酸合成酶(FAS)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)活性(P<0.05),幼魚實(shí)驗(yàn),當(dāng)VA為2000IU組時(shí),F(xiàn)AS、LPL活性最高,但FAS活性2000組和8000組無顯著性差異(P>0.05),而對(duì)于HL活性,兩實(shí)驗(yàn)均在4000IU組時(shí)最高(P<0.05);中魚實(shí)驗(yàn),F(xiàn)AS、HSL活性在8000IU組最高,LPL活性在4000IU組最高,而棕櫚酸酯酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-1)活性受VA水平影響顯著(P<0.05)
7、;肝臟VA沉積量隨飼料VA水平增加而顯著升高(P<0.05);缺乏或過量添加VA顯著抑制FAS和HL mRNA表達(dá),添加適量VA顯著促進(jìn)FAS和HL mRNA表達(dá)(P<0.05)。
綜上可知,在本實(shí)驗(yàn)中,以生長(zhǎng)性能、飼料系數(shù)和免疫酶活性為判斷依據(jù),VA是斜帶石斑魚生長(zhǎng)、健康的必需營養(yǎng)素,當(dāng)飼料中添加1000IU-2000IU/kgVA時(shí),斜帶石斑魚的生長(zhǎng)性能、飼料利用和免疫功能達(dá)到最高值。以血清生化指標(biāo)、脂肪代謝酶活性、肝臟V
8、A沉積量和FAS、HL mRNA表達(dá)量為判斷依據(jù),在VA添加量為2000IU-4000IU/kg時(shí)脂類分解代謝得到顯著提高,顯著高于對(duì)照組和20000IU組(P<0.05),從而可有效提高和改善斜帶石斑魚脂肪代謝,防止因脂肪沉積過多而引起病變。
2.本研究采用白魚粉、明膠和酪蛋白(去維生素)為主要蛋白源,魚油、玉米油和磷脂油為主要脂肪源,配制含VD添加水平分別為0,500,1000,2000,4000和10000IU/kg的6
9、組實(shí)驗(yàn)飼料。養(yǎng)殖周期均為10W。結(jié)果表明:對(duì)生長(zhǎng)和飼料利用的影響表現(xiàn)為:飼料VD添加水平對(duì)其有顯著影響(P<0.05);幼魚實(shí)驗(yàn),當(dāng)VD添加為1000IU/kg時(shí),WGR和飼料利用最高(P<0.05);而中魚實(shí)驗(yàn),當(dāng)VD添加為500-1000IU/kg時(shí),WGR最高,但VD水平對(duì)FC的影響不顯著(P>0.05);成活率結(jié)果則不受VD水平的影響(P>0.05);HIS和成活率呈現(xiàn)相同的變化規(guī)律。對(duì)于體成分分析結(jié)果為,幼魚階段,全魚體CP、
10、CF和CA均不受VD水平影響(P>0.05);中魚階段,全魚體CP受VD水平影響顯著(P<0.05),1000IU組最高;而CF和CA則不受VD水平影響(P>0.05),但隨VD水平增加,肝臟脂肪含量呈現(xiàn)先降后升趨勢(shì),在4000IU組最低(P<0.05);血清中酶活性測(cè)定結(jié)果為,幼魚階段,在VD水平為4000IU組AKP活性最高,1000IU組SOD活性最高(P<0.05);中魚階段,AKP、SOD活性則不受VD水平影響(P>0.05)
11、;肝臟中免疫指標(biāo)測(cè)定結(jié)果為,幼魚階段,肝臟SOD活性隨VD水平增加而呈先升后降趨勢(shì)(P<0.05);中魚階段,肝臟SOD活性不受添加VD水平的影響;但顯著降低血清MDA含量和ACP活性(P<0.05);血清生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果為,幼魚階段,CHOL和LDL-C含量不受VD水平影響(P>0.05),但TG含量隨VD水平增加呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì)(P<0.05),而HDL-C含量則呈先降低后升高趨勢(shì);中魚階段,TG、HDL-C和LDL-C變化趨勢(shì)與幼
12、魚階段相同,但CHOL含量隨VD水平變化呈現(xiàn)逐漸降低趨勢(shì),對(duì)照組含量最高(P<0.05);肝臟酶活性測(cè)定結(jié)果為,幼魚階段,VD水平顯著降低FAS活性,并且促進(jìn)總脂酶(LPL和HL活性總和)活性(P<0.05);中魚階段,F(xiàn)AS和總脂酶活性變化趨勢(shì)與幼魚階段相同,且隨著VD水平增加,HSL活性顯著提高(P<0.05),而CPT-1活性則降低(P<0.05); mRNA表達(dá)量測(cè)定結(jié)果為,隨飼料VD水平增加FAS和HL mRNA表達(dá)量變化趨勢(shì)
13、相似,均呈現(xiàn)先升后降趨勢(shì)(P<0.05);肝臟VD沉積量測(cè)定結(jié)果為,隨飼料VD水平增加兩實(shí)驗(yàn)階段,肝臟VD沉積量均呈指數(shù)型增加。
綜上可見,本實(shí)驗(yàn)中,以生長(zhǎng)性能和飼料利用為判斷依據(jù),對(duì)于兩種規(guī)格斜帶石斑魚,當(dāng)飼料VD添加水平為1000IU/kg時(shí),生長(zhǎng)最好;以FAS、LPL、HL、HSL等酶活性為判斷依據(jù),飼料VD水平在2000IU/kg時(shí),對(duì)斜帶石斑魚脂肪分解有顯著改善作用;以FAS、HL mRNA表達(dá)量為判據(jù),VD水平為1
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