鵝A-FABP和MSTN基因與肥肝性狀同步調(diào)控機制研究.pdf

1、本試驗以青農(nóng)灰鵝（肥肝型）為研究對象，根據(jù)鵝A-FABPmRNA序列(AF472610)和雞A-FABP基因組序列(AY675941)設(shè)計1對引物，擴(kuò)增鵝A-FABP基因內(nèi)含子Ⅰ序列。選取200只，體重相似的12周齡健康青農(nóng)灰鵝進(jìn)行填飼。分別在填飼0d、6d、12d、18d、24d、30d，選取15只試驗鵝進(jìn)行屠宰、取樣與測定;應(yīng)用PCR-SSCP技術(shù)測定基因多態(tài)性;采用乙醚浸提法和氣相色譜法測定肝臟中脂肪和脂肪酸含量;利用實時熒光定量

2、PCR技術(shù)測定A-FABP與MSTN基因在不同填飼日齡鵝肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胸肌、腿肌和腹脂中的表達(dá)量;用SPSS17.0軟件對不同基因型與屠宰、肥肝性狀的相關(guān)性，兩基因表達(dá)量的相關(guān)性以及兩基因表達(dá)量與肥肝性狀的相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示:
　　 1鵝A-FABP基因內(nèi)含子Ⅰ序列長為1473bp(登錄號:GenBankaccessionHQ833815)，與其它12個物種序列比較，發(fā)現(xiàn)其與鴨的同源性達(dá)到94.42％，與雞的同源

3、性為81.82％。經(jīng)SNPs檢測發(fā)現(xiàn)，P2和P3擴(kuò)增產(chǎn)物存在變異位點。遺傳多態(tài)性分析，A、B兩個等位基因的基因頻率分別為0.597和0.403，多態(tài)信息含量(PIC)是0.365，基因型分布未偏離Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(x2=0.020，P＞0.05);D、E兩個等位基因的基因頻率分別為0.483和0.517，PIC是0.375，基因型分布偏離Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(x2=6.782，0.01＜P＜0.05)

4、。表明，鵝A-FABP基因內(nèi)含子Ⅰ序列遺傳變異處于中度多態(tài)，P2擴(kuò)增產(chǎn)物的基因型分布處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)，P3擴(kuò)增產(chǎn)物的基因型分布偏離Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。
　　 2填飼0d、6d、18d、24d、30d，肥肝鵝的活重、屠體重、胸肌重、腿肌重、腹脂重、全凈膛重和半凈膛重基因型為AB型＞AA型＞BB型;填飼12d，以上屠宰性狀基因型為AA型＞AB型＞BB型。填飼0d，腿肌重AB型與BB型差異顯著

5、(P＜0.05)。填飼6d，全凈膛重AB型與AA型差異顯著(P＜0.05)。填飼12d，活重AA型與BB型差異顯著(P＜0.05);屠體重AA型與AB、BB型差異顯著(P＜0.05)。填飼18d，腿肌重AB型與BB型差異顯著(P＜0.05)。填飼24d，活重AB型與BB型差異顯著(P＜0.05);屠體重AB型與AA、BB型差異顯著(P＜0.05);腿肌重AB型與BB型差異顯著(P＜0.05);全凈膛重AB型與AA、BB型差異顯著(P＜0

6、.05);半凈膛重AB型與AA、BB型差異顯著(P＜0.05)。填飼30d，腹脂重AB型與AA型差異顯著(P＜0.05)。表明，A-FABP基因引物P2位點A等位基因與活重、屠體重、胸肌重、腿肌重、腹脂重、全凈膛重和半凈膛重這些屠宰性狀指標(biāo)呈正相關(guān)。
　　 填飼0d的總不飽和脂肪酸含量;填飼12d的肥肝重;填飼24d和30d，肝內(nèi)脂肪含量基因型均為AA型＞AB型＞BB型。填飼0d的肥肝重、肝內(nèi)脂肪、總飽和脂肪酸含量;填飼6d和1

7、8d的肥肝重、肝內(nèi)脂肪、總不飽和脂肪酸及總飽和脂肪酸含量;填飼12d的肝內(nèi)脂肪、總不飽和脂肪酸及總飽和脂肪酸含量;填飼24d和30d的肥肝重、總不飽和脂肪酸、總飽和脂肪酸含量基因型為AB型＞AA型＞BB型。填飼0d，肝內(nèi)脂肪含量AB型與AA、BB型差異顯著(P＜0.05)。填飼24d，肝內(nèi)脂肪含量AA、AB型與BB型差異顯著(P＜0.05);肥肝重AB型與BB型差異顯著(P＜0.05)。填飼30d，肝內(nèi)脂肪含量AA、AB型與BB型差異顯

8、著(P＜0.05);總不飽和脂肪酸含量AB型與AA、BB型差異顯著(P＜0.05)。表明，A-FABP基因引物P2位點A等位基因與肥肝重、肝內(nèi)脂肪、總不飽和脂肪酸及總飽和脂肪酸這些肥肝性狀指標(biāo)呈正相關(guān)。
　　 3A-FABP基因在肝臟和腹脂中的表達(dá)變化趨勢為先升高后下降，分別在填飼24d和12d達(dá)到最大值(15.90±0.04、12.72±0.12);腿肌和胸肌中的總體表達(dá)規(guī)律也為先升高后下降，填飼18d有小幅下降，填飼24d達(dá)

9、到最大值，分別為8.88±0.06、6.33±0.13，且肝臟、腹脂、腿肌和胸肌中基因表達(dá)量的最大值與其它填飼日齡差異均極顯著(P＜0.01)。MSTN基因在腿肌和胸肌中的表達(dá)規(guī)律為先升高后下降，均在填飼18d達(dá)到最大值(5.79±0.14、3.67±0.14)，且與其它填飼階段差異極顯著(P＜0.01)。鵝肝臟組織中A-FABP基因表達(dá)量與肝重、肝內(nèi)脂肪、總不飽和脂肪酸及總飽和脂肪酸含量呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.576、0.510、