

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、食品常見有害物質的測定1 概述2食品中有機磷農藥殘留量的測定3食品中黃曲霉毒素的測定,食品中常見有害物質的測定,有害物質成分: 農藥、黃曲霉毒素、苯并比、亞硝胺類化合物、苯酚、多氯聯(lián)苯、動植物毒素、氰化物、重金屬元素、非金屬元素、添加劑、激素、抗生素、獸藥,食品中農藥殘留量的測定農藥:農業(yè)生產中使用的各類農藥。常用的有有機氯農藥和有機磷農藥2大類。農藥殘留:指未分解而留存于土壤作物及環(huán)境進而留存與食品的農藥。測定方
2、法:2003年新制定的《食品衛(wèi)生檢驗方法》增加了42種測定農藥的方法。用得較多的是氣相色譜法,其次是高效液相色譜法、分光光度法。,一、有機氯農藥殘留量的測定(GB/T5009·19—2003) 方法: 第一法 氣相色譜法 第二法 薄層色譜法有機氯農藥的提取步驟:有機溶劑(丙酮、石油醚)提取凈化濃縮,,,食品中有機磷農藥殘留量的測定測定方法多,最有代表的:GB/T500
3、9·20—2003: 第一法: 水果、蔬菜、谷類中有機磷農藥的多殘留的測定該法采用的是氣相色譜法,可檢測20種有機磷農藥。 第二法: 糧、菜、油中有機磷農藥殘留量的測定。該法采用的也是氣相色譜法,可檢測9種有機磷農藥。兩者區(qū)別:用不同的色譜分離柱。GB/T5009·199—2003(蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測): 速測卡片(紙片法) 酶抑制率法(分光光度法)本
4、法為定性檢驗方法,因為速度快,廣泛使用中。,⑴原理膽堿酯酶底物(碘化硫代乙酰膽堿)+顯色劑(二硫代二硝基苯甲酸)→有色物質 PH8.0無農藥,膽堿酯酶催化能力強,顯色深。有農藥,膽堿酯酶催化能力弱,顯色淺。吸光度變化小,與對照溶液的吸光度差值大,抑制率大,農藥含量高。⑵試劑⑶儀器,⑷測定步驟樣品處理對照溶液的吸光度變化值測定⊿A0 = A3min
5、-A開始樣品液的吸光度變化值測定⊿At = A3min-A開始⑸結果計算與判斷 ⊿A0-⊿At抑制率(%)= ——————×100 ⊿A0若抑制率≥50%為陽性結果,抑制率越大,農藥殘留量越高。,第二節(jié) 食品中黃曲霉毒素的測定一、有關知識黃曲霉毒素:AFT分類:AFTB、AFTG特征:(1)性
6、質特征污染糧油及其制品對光、熱、酸穩(wěn)定,對堿和氧化劑不穩(wěn)定,(2)結構特征: 含二呋喃環(huán)、香豆素(3)測定方法:薄層色譜法牛清抗體反應顯色法微粒篩選法二、黃曲霉毒素B1(AFT B1)測定(GB/T5009·22—2003) 第一法 薄層色譜法 第二法 牛清蛋白抗體反應顯色法,薄層色譜法測定黃曲霉毒素B1測定1、原理 樣品中AFT B1經有機溶劑提取、凈化、濃縮并
7、經薄層色譜分離后,在波長365nm紫外光下產生熒光,根據(jù)其在薄層板上顯示熒光的強度與標準品AFT B1最低檢出量產生的熒光強度比較來測定樣品中AFT B1的含量。,2、試劑三氯甲烷(AR) 正己烷(AR 沸程30-60)或石油醚(沸程60-90)甲醇(AR)苯(AR)乙腈 (AR)無水乙醚 (AR)丙酮 (AR)(以上試劑應重蒸,并應經檢驗對薄層色譜測定無干擾),苯-乙腈(98:2)混合溶液甲醇-水(55:45
8、)混合溶液三氟乙酸(AR)氯化鈉 (AR)無水硫酸鈉(AR)硅膠G (薄層色譜用) 5%次氯酸鈉:稱取100g漂白精,加入500mL水,攪勻。另將80g工業(yè)用碳酸鈉(Na2CO3.10H2O)溶于500mL溫水中,倒入上述溶液中,攪勻,澄清過濾后貯存于帶橡皮塞的玻璃瓶中,用作消毒劑。,黃曲霉毒素B1標準貯備液: 用百萬分之一的微量分析天平精密稱取1-1.2mgAFT B1標準品,先加入2mL乙腈溶解后,
9、再用苯稀釋至100mL,避光置于4℃冰箱中保存。使用前用紫外分光光度計測定其濃度,再用苯-乙腈混合溶液調整其濃度為10ug/mL。(在350nm測定AFT B1的苯-乙腈溶液的吸光度,其摩爾消光系數(shù)為19800,可根據(jù)朗伯-比爾定律求出其濃度)。,黃曲霉毒素B1標準應用液I(1ug/mL):吸取1.0mL10ug/mL的黃曲霉毒素B1標準貯備液于10mL容量瓶中,加苯-乙腈混合溶液定容。黃曲霉毒素B1標準應用液II(0.2ug/mL)
10、:吸取1.0mL 1ug/mL的黃曲霉毒素B1標準應用液I于5mL容量瓶中,加苯-乙腈混合溶液定容。黃曲霉毒素B1標準應用液III(0.04ug/mL):吸取1.0mL 0.2ug/mL的黃曲霉毒素B1標準應用液II于5mL容量瓶中,加苯-乙腈混合液定容。,3、主要儀器玻璃板:5×20cm涂布器色譜展開槽(25×6×4cm)紫外光燈:100-125W,帶有波長365nm濾光片微量注射器:20uL
11、,10uL各一支,4、操作步驟⑴、樣品預處理 稱取4g混勻的花生油樣品于小燒杯中,用20mL石油醚或正己烷,將其轉移到125mL分液漏斗中,用20mL甲醇-水溶液分數(shù)次洗燒杯,洗液并入分液漏斗中,振搖2分鐘,靜止分層后,將下層甲醇-水溶液移入第二分液漏斗,再用5mL甲醇-水溶液重復提取一次,提取液并入第二分液漏斗中。在第二分液漏斗中加入20mL三氯甲烷,振搖2分鐘,靜止分層后,放出三氯甲烷層,經盛有約10g先用三
12、氯甲烷濕潤的無水硫酸鈉的慢速濾紙過濾于50mL蒸發(fā)皿中,分液漏斗中再加5mL三氯甲烷提取一次,三氯甲烷層一并濾入蒸發(fā)皿中,最后用少量三氯甲烷洗過濾器,洗液并入蒸發(fā)皿中。在通風柜中,將蒸發(fā)皿于65℃水浴上揮干,然后放入冰盒上泠卻2-3分鐘,準確加入1mL苯-乙腈混合液,用帶橡皮頭滴管的管尖將殘渣充分混合,若有結晶析出,將蒸發(fā)皿取下,繼續(xù)溶解、混勻,晶體消失后用滴管吸取上清液轉移于2mL具塞試管中。,⑵、樣品測定1>薄層板的制備
13、 稱取約3g硅膠G,加相當于硅膠量的2-3倍左右的水,用力研磨1-2分鐘,至成糊狀后立即倒入涂布器內,推鋪成5×20cm、厚度為0.25 mm的薄層板三塊。于空氣中干燥約15分鐘后,在100℃下活化2小時,取出放入干燥器中保存。,2>點樣 將薄層板邊緣附著的吸附劑刮凈,在距薄層板底端3cm的基線上用微量注射器滴加樣液和標準液:第一點:10uL 0.04ug/mL AFT B1 標液
14、第二點:20uL樣液第三點:20uL 樣液 + 10uL 0.04ug/mL AFT B1 標液第四點:20uL 樣液 + 10uL 0.2ug/mL AFT B1 標液 要求點距邊緣和點間距約為1cm,樣點直徑約3cm,大小相同,點樣時可用電吹風冷風邊吹邊點。,3>展開 在展開槽內加10mL無水乙醚,將點好樣的薄層板預展12cm,取出揮干。再于另一展開槽內加10mL 丙酮+三氯
15、甲烷(8+92)混合溶劑,展開10-12cm,取出揮干。,4>結果觀察 將展開好的薄板放在365nm的紫外燈光下觀察:a.若第一點無熒光或都無熒光。說明薄板或展開劑未制備好,需重新制備。b.第一點有熒光,而其余三點無熒光。說明樣液中有熒光猝滅劑,樣液需重新制備。c.第一點有熒光,第二點無熒光,三、四點有熒光。說明樣液不含AFT B1或含量小于最低檢出量。d.四個點都有熒光。需做確證實驗后再進行定量。,5&g
16、t;確證實驗 于另一薄板上左邊依次點二個樣:第一點:10uL0.04ug/mL AFT B1標液第二點:20uL樣液 在以上兩點各加一小滴三氟乙酸(TFA),待反應5分鐘后,用電吹風熱風2分鐘,使溫度不高于40℃。 再于薄層板的右邊點以下二個點:第三點:10uL 0.04ug/L AFT B1 標液第四點:20uL樣液 同第3>步展開后,于紫外光下觀察樣液是否產生與AFT B1標準點
17、相同的衍生物AFT B2a ,未加TFA的第三、四點作空白對照。,6>稀釋定量若第二點的熒光強度比第一點強,則根據(jù)其強度估計減少點樣體積,于另一薄板上點四個點:第一點:10uL 0.04ug/mL AFT B1標液第二點:10uL 樣液第三點:15uL 樣液第四點:20uL 樣液展開后取熒光強度與第一點相同的樣點進行計算。,5、計算 V1
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 煙草中有機磷農藥殘留量測定方法研究.pdf
- 食品中有毒有害物質檢測詳解
- 氨基衍生熒光分光光度法測定食品中有害物質殘留.pdf
- 2010韓國食品中有害物質監(jiān)測計劃
- 包裝材料和食品容器中有害物質
- 食品中有害物質檢測技術研究.pdf
- 食品中有毒有害物質快速檢測方法研究.pdf
- 熒光法測定有機磷農藥殘留量及應用.pdf
- [醫(yī)藥衛(wèi)生]第十三章食品中有毒有害物質的測定
- 食品塑料包裝中有害物質遷移的研究概況
- 食品中有機磷農藥檢測方法綜述
- 中藥中有機磷類農藥殘留量、有害元素和黃曲霉毒素檢測方法的研究.pdf
- 飼料中有毒有害物質的測定課件
- 食品接觸材料中有害物質遷移行為的研究.pdf
- 熒光偏振免疫分析在食品藥品中有害物質殘留檢測的應用研究.pdf
- 植物源性食品中91種有機磷類農藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法
- GC-MS測定丹參中有機氯、有機磷農藥殘留的研究.pdf
- 硅橡膠食品墊中有害物質遷移規(guī)律及其使用壽命.pdf
- 測定環(huán)境水體中有機磷農藥的測定方法
- 化妝品常見有害物質
評論
0/150
提交評論