高糖對人臍靜脈內皮細胞CD26的表達及MBL補體激活途徑的影響及作用機制.pdf

1、目的：觀察高糖培養(yǎng)下人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）的CD26表達變化、甘露聚糖結合凝集素(MBL)補體途徑的激活及炎癥因子（IL-6和NF-kB）的表達情況，探討CD26在糖尿病腎病（DN）慢性炎癥發(fā)病機制中的作用，為CD26抑制劑治療DN尋求基礎研究依據。
　　方法：體外培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞，分別設置正常對照組（含葡萄糖5.5mmol/L），甘露醇組（含葡萄糖5.5mmol/L+甘露醇24.5mmol/L），高糖組（含葡萄糖30

2、mmol/L）,采用免疫組織化學法檢測細胞表面CD26、MBL、C3和膜攻擊復合物(MAC)的表達，采用Western Blot檢測細胞的CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達，采用實時熒光定量PCR(real-time PCR)檢測細胞中CD26、IL-6和NF-kB mRNA的表達情況。
　　結果：⑴免疫組化提示：在HUVEC中CD26、MBL、C3、膜攻擊復合物（MAC）主要表達于胞膜和胞漿。高糖組CD26、MBL、C3及

3、MAC的蛋白表達均明顯高于正常組與甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標蛋白表達量均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。CD26與MBL、C3、MAC蛋白表達量均呈明顯正相關（r=0.874，r=0.952，r=0.947，P＜0.01）。⑵ Western Blot提示：高糖組CD26、MBL、C3及MAC的蛋白表達亦明顯高于正常組及甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標蛋白表達量均無統(tǒng)計學意義（P＞0.

4、05）。CD26與MBL、C3、MAC蛋白表達量呈明顯正相關（r=0.825，r=0.869，r=0.828，P＜0.01）。⑶ RT-PCR提示：高糖組CD26、IL-6、NF-kB的mRNA表達均高于正常組及甘露醇組（P＜0.05）；在正常組與甘露醇組之間，各指標mRNA表達量均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。CD26與IL-6、NF-kB的mRNA表達量均呈正相關（r=0.858，r=0.794，P＜0.05）。
　　結論：體