風濕病實驗室檢查

1、風濕性疾病常用實驗室檢查,高 薇,一、一般檢查,（一）血、尿常規(guī)（二）血沉（三）C-反應蛋白（CRP）（四）心肌酶譜（五）抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）（六）免疫球蛋白（七）補體,二、自身抗體,定義：是指能與機體正常組織成份或改變了的組織成份起反應的抗體分類 器官特異性的 非器官特異性的檢測方法：間接免疫熒光、免疫雙擴散、對流免疫電泳、免疫印跡及ELISA法等,,（一）抗核抗體（ANA

2、）,ANA是抗細胞核抗原成份的自身抗體的總稱。ANA是針對細胞核內(nèi)DNA、RNA、蛋白質(zhì)、脂類、酶類或這些物質(zhì)的分子復合物的抗體。上述這些物質(zhì)不僅存在細胞核內(nèi)，也可存在于細胞漿和其他細胞器中。因此，ANA的概念已不再局限于抗核成份。ANA是指抗核酸與核蛋白抗體的總稱。用間接免疫熒光法（IIF）檢測，大于1：40為ANA陽性。,抗核抗體譜,目前已發(fā)現(xiàn)具有不同臨床意義的ANA約20余種,這些ANA組成了“抗核抗體譜”。 抗核抗

3、體譜分為四類： Ⅰ類：抗DNA抗體：抗雙鏈DNA抗體 抗單鏈DNA抗體 Ⅱ類：抗組蛋白抗體（AHA） Ⅲ類：抗非組蛋白抗體：抗ENA抗體 抗著絲點抗體（ACA） Ⅳ類：抗核仁抗體,ANA陽性時常見的熒光染色核型,均質(zhì)型（H型）：與抗DNA抗體及抗

4、組蛋白抗體相關。斑點型（S型）：與抗ENA抗體相關。核膜型（M型）：與抗雙鏈DNA抗體相關。核仁型（N型）：多見于硬皮病。,ANA陽性的臨床意義,1、是結締組織?。–TD）的篩選試驗 見于 SLE、SS、SSc、MCTD等。2、肝臟病 如PBC、AIH等。3、肺疾患 原發(fā)性肺纖維化（IPF）、原發(fā)性 肺動脈高壓、石棉肺等。4、血液病 淋巴瘤、骨髓瘤、ITP等。5、慢性感染 如肺結核、麻風

5、、血吸蟲病等。,1、抗雙鏈DNA抗體（抗ds-DNA抗體）,以馬疫錐蟲為底物，用IIF檢測，在SLE的陽性率為40%是SLE的標記性抗體抗體滴度的高低與SLE病情活動正相關此抗體陽性時，易罹患狼瘡性腎炎,2、抗組蛋白抗體（AHA）,組蛋白是一組與DNA結合的富含賴氨酸和精氨酸的堿性蛋白。AHA用ELISA方法檢測，其陽性的臨床 意義： SLE患者50%為陽性 　藥物性狼瘡（DIL）95%～100%

6、呈陽性 AHA陽性對診斷DIL有幫助，但不能確診,3、抗非組蛋白抗體,抗非組蛋白抗體中最重要的是抗ENA抗體。可提取性核抗原（ENA）是用生理鹽水從動物胸腺、肝脾等細胞核中提取的酸性糖蛋白。抗可提取性核抗原抗體稱為抗ENA抗體。抗ENA抗體也是一組抗體，目前用免疫印跡法（IBT）檢測的有7種，分述如下,抗Sm抗體,在名為Smith的SLE患者血清中發(fā)現(xiàn)該抗 體,簡稱為抗Sm抗體。該抗體在SLE患者的陽性率為2

7、5～30%。是SLE的標記抗體，但與病情活動無關。此抗體陽性的SLE患者易患狼瘡性腦病。,抗U1RNP抗體,核糖核蛋白（RNP）富含尿嘧啶（Uridine), 且主要存在于U族小分子RNP的第一組分中，故稱為U1RNP，其抗體簡稱抗U1RNP抗體。高滴度的抗U1RNP抗體是MCTD的必備指標。低滴度的抗U1RNP抗體尚可見于SLE和SSc。此抗體陽性時，腎炎的發(fā)生率低。,值得注意的是：,抗Sm抗體陽性時，抗U1RNP抗體

8、肯定陽性；抗U1RNP抗體陽性時，抗Sm抗體可陰性；即SLE時，抗Sm抗體陽性時，抗U1RNP抗體肯定是陽性。而MCTD時，抗U1RNP抗體陽性而抗Sm抗體卻陰性。,抗SSA/Ro抗體,50年代末首先在干燥綜合征（Sjögren syndrome,SS)患者血清中發(fā)現(xiàn)這種抗體，稱為抗SSA抗體。60年代中期又在名為Ro的SLE患者血清中也發(fā)現(xiàn)了抗SSA抗體。曾稱名抗Ro抗體。現(xiàn)已證實SSA和Ro抗原是同一物質(zhì)，故稱為抗SS

9、A抗體（或抗SSA/Ro抗體）,抗SSA抗體的臨床意義,在原發(fā)性干燥綜合征時，此抗體陽性率為60%。約40%SLE患者此抗體為陽性。RA及SSc等繼發(fā)干燥綜合征時此抗體為陽性。在亞急性皮膚型紅斑狼瘡（SCLE）時，此抗體陽性率可高達75%而ANA可陰性。,抗SSB/La抗體,現(xiàn)已證實1975年命名抗SSB抗體與1974年發(fā)現(xiàn)的抗La抗體為同一抗體，簡稱抗SSB抗體。其臨床意義如下：原發(fā)性干燥綜合征，此抗體陽性率為40%?？筍S

10、B抗體陽性對診斷SS比抗SSA抗體陽性更具特異性，故可認為抗SSB抗體是SS的標記性抗體?？筍SB抗體陽性時，抗SSA抗體肯定陽性，但抗SSA抗體陽性時，抗SSB抗體可以陰性。,抗Scl-70抗體,Scl是硬皮病的英文簡寫，70是該抗體相對應的抗原的分子量70KD?？筍cl-70抗體陽性臨床意義如下：是硬皮病的標記性抗體（IBT陽性20～40%）硬皮病合并腫瘤時，該抗體陽性率可高達80%以上。此抗體陽性的硬皮病患者，易合并肺間質(zhì)

11、病變。此抗體與心腎受累無關。,抗Jo-1抗體,抗Jo-1抗體是以John患者的名字命名，1980年首次在多發(fā)性肌炎（PM）患者血清中發(fā)現(xiàn)。Jo-1抗原是組氨酰tRNA合成酶，分子量為55KD。其抗體又稱抗PL-1抗體。抗Jo-1抗體是PM/DM的標記性抗體，陽性率約為25%。PM/DM合并肺間質(zhì)病變時抗Jo-1抗體陽性率可達60%。,抗Jo-1抗體綜合征,抗Jo-1抗體陽性的PM/DM患者，除肌無力外，尚有發(fā)熱、白細胞增高、間質(zhì)性

12、肺炎、關節(jié)炎、雷諾現(xiàn)象和“技械工人手”（指雙手外側掌面皮膚出現(xiàn)角化、皸裂伴色素沉著）。,抗核糖體抗體（抗Rib抗體）,抗核糖體抗體全稱為抗核糖體核糖核蛋白抗體，也簡稱為抗rRNP抗體。　其臨床意義如下：約10%SLE患者此抗體陽性，也是SLE的標記性抗體。此抗體陽性的SLE，易合并狼瘡性腦病。此抗體陽性而ANA陰性的患者，數(shù)年后終將發(fā)展成典型的SLE。,抗核抗體（ANA）—— CTD篩選試驗　抗ds-DNA抗體 —— S

13、LE標記性抗體 抗ENA抗體，其中包括：　　 　抗Sm抗體 —— SLE標記性抗體　抗U1RNP抗體——MCTD標記性抗體　抗SSA抗體——SS的抗體　抗SSB抗體——SS標記性抗體　抗Scl-70抗體——硬皮病標記性抗體　抗Jo-1抗體——PM/DM標記性抗體　抗Rib抗體——SLE標記性抗體,（二）抗核小體抗體（AnuA）,核小體（nucleosome)是細胞凋亡過程中染色體裂解后釋放的染色質(zhì)成份，由8個帶正

14、電荷的組蛋白分子（H2A、H2B、H3和H4各2個分子）組成。2000年國外學者用ELISA方法檢測抗核小體抗體（AnuA），本抗體識別的抗原表位是（H2A-H2B）-DNA復合物，該復合物可能是引起狼瘡性腎炎的原因之一。,AnuA的臨床意義,1、對SLE診斷的敏感性高（56%），特異性強（97%）。2、出現(xiàn)在SLE早期，是病情活動的指標之一。3、與狼瘡性腎炎密切相關。4、對抗ds-DNA、抗Sm抗體陰性的SLE的診斷具有重要

15、意義。5、在SSc和MCTD等也可陽性。,（三）類風濕因子（RF）,類風濕因子是抗人或動物免疫球蛋白IgG分子Fc片段的特異性抗原決定簇的免疫球蛋白。常用乳膠凝集法檢測IgM型類風濕因子（IgM-RF)。RF在類風濕關節(jié)炎的陽性率為70%。RF在SLE、SS、SSc等風濕病也可陽性。RF在慢性肝病、結核等某些感染性疾病也可陽性。RF在正常老年人約5%陽性。,（四）抗角蛋白抗體譜,這是與早期類風濕關節(jié)炎相關的一組自身抗體，包括:

16、 抗核周因子（APF） 抗角蛋白抗體（AKA）、 抗聚角蛋白微絲蛋白抗體（AFA） 抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）,1、抗角蛋白抗體（AKA）,用IIF檢查大鼠食道中1/3的角質(zhì)層，若出現(xiàn)板層狀和線狀沉積的熒光時，為AKA陽性。AKA是早期RA的診斷指標之一。AKA在RA的陽性率為40～60%，特異性為96%。AKA與RA的病情嚴重程度正相關

17、。AKA陽性的RA患者，預后較差。,2、抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（抗CCP抗體）,目前用ELISA方法檢測。是診斷早期RA的指標之一。在RA陽性率為46.6%，特異性為96.6%。此抗體陽性的RA患者骨質(zhì)破壞較重。是國內(nèi)目前最常用的診斷早期RA的指標。,（五）抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）,ANCA是第一個被證實與血管炎相關的自身抗體。 胞漿型ANCA（c-ANCA） 核周型ANCA（p-ANCA）c-ANC

18、A的靶抗原主要是絲氨酸蛋白酶3（PR3）。c-ANCA陽性常見于Wegener肉芽腫，且其滴度與該病的活動性正相關，故對診斷Wegener肉芽腫有高度的敏感性和特異性。,,p-ANCA的靶抗原主要是髓過氧化酶（MPO）P-ANCA陽性除見于顯微鏡下多血管炎、變應性肉芽腫血管炎（Churg-Strauss)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關節(jié)炎和壞死性新月體腎小球腎炎外，還可見于自身免疫性肝病、潰瘍性結腸炎、克隆病等?？梢?，p-ANCA與疾病的

19、相關性較c-ANCA特異性差。,（六）抗磷脂抗體,抗磷脂抗體包括抗心磷脂（ACL）抗體和狼瘡抗凝物等針對自身不同磷脂成份的自身抗體。目前臨床上常用的是用ELISA方法檢測的抗心磷脂（ACL）抗體。中高滴度陽性的IgG型ACL抗體最具特異性，用于診斷抗磷脂綜合征?？沽字C合征（APS）是一組與抗磷脂抗體（主要是ACL）有關的臨床征侯群。除ACL抗體陽性外，還有反復動脈、靜脈血栓形成，習慣性流產(chǎn)和血小板減少等臨床表現(xiàn)。,（七）抗線粒體抗

20、體（AMA）,AMA是以線粒體為靶抗原的自身抗體。AMA陽性是診斷原發(fā)性膽汗性肝硬化（PBC）的實驗室指標。AMA陽性除PBC外，尚可見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、硬皮病等。近來研究發(fā)現(xiàn)AMA共有九個亞型（M 1～9），其中M2靶抗原的主要成份是丙酮酸脫氫酶復合物，其抗體稱為AMA-M2。 AMA-M2在PBC的陽性率為96%，是PBC的特異性抗體。,（八）抗平滑肌抗體（SMA）,SMA是一種抗肌動蛋白抗體。由于在平滑